クロマチン構造変換の及ぶ領域を調節し局限化する機構

调节和定位受染色质结构变化影响的区域的机制

基本信息

批准号：
18055032
负责人：
石井浩二郎
金额：
$ 5.06万
依托单位：
Kurume University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18055032/
关键词：
クロマチン遺伝子染角体構造変換転写 RNAi 染色体構造変換

项目摘要

ヘテロクロマチン化は遺伝子転写に対して抑制的に働くクロマチン構造変換のひとつの典型であり、染色体形態を凝集型へと大きく変化させる。ヘテロクロマチン化反応は本質的に可逆的であるため、ヘテロクロマチン領域の成立にはクロマチン構造の確立と維持の二つの作用が必要とされる。一方ヘテロクロマチン領域は、ヌクレオソーム構造の共通性を分子基盤に近隣のクロマチン領域へと拡大していく潜在能力を持つ。分裂酵母ではそのようなヘテロクロマチン領域の形成もしくは拡大に細胞性のRNAi装置が必要なことが判明しており、拡散能力を備えたRNAi装置がヘテロクロマチン構造変換の及ぶ領域の局限化に機能していると考えられる。これまで、セントロメアヘテロクロマチン領域に由来するノンコーディングRNAがsiRNAに変換される過程の分子レベルでの解析を継続して行ってきた。本年度はそれら内在性のノンコーディングRNAに共通する配列要素SIREに結合するタンパク質因子の探索を行った。核抽出液を用いたゲルシフトアッセイによって、SIREや類似配列RNAに対するバンドシフトが得られ、分裂酵母のタンパク質精製をすすめることによって、その少なくとも一部は細胞性RNAi装置のエフェクター複合体であるRITSによって生み出されていることが判明した。SIRE類似RNAへの結合は、RITSの必須コンポーネントであるago1の変異株に加え、細胞内のsiRNA生成が不能なdcr1やrdp1など他のRNAi装置変異株から精製したRITSでは失われ、siRNAとの塩基配列依存的な結合を検出していると考えられる。その特異性に関する解析はさらに深められている。

异染色质是典型的染色质结构转化之一，可抑制对遗传转移的作用，并大大将染色体形式变成骨料。由于异染色质反应基本上是可逆的，因此杂咬蛋白蛋白蛋白蛋白蛋白素面积的建立需要两种影响：建立染色质结构和维护。另一方面，异染色质区域具有将核 - 疾病结构的通用性扩展到附近的染色质区域，作为分子碱。已经发现，叶子酵母需要一个细胞RNAi装置，以形成或膨胀异染色质区域，并且具有扩散能力功能的RNAi装置限制了杂细胞染色质结构的区域被认为是。到目前为止，我们已经在分子水平上继续分析，该过程是从丝粒杂环区域到siRNA的非编码RNA的过程。今年，我们搜索了与内部非编码RNA共有的序列元素父亲结合的蛋白质因子。通过使用核提取的Gelsift测定，将带向父亲和类似的阵列RNA，至少由RITS创建了一部分，这是细胞RNAi设备的效应络合物。与父亲相似的RNA键丢失，这是从其他RNAi设备变体（例如DCR1和RDP1）中进行的，这些变体无法在细胞中产生siRNA，此外还认为这是必需组件的突变体。检测到基本序列依赖性键。对其特殊性的分析已进一步加深。