アポトーシス細胞を認識する新しいレセプターLMIR3/4の機能解析

识别凋亡细胞的新受体LMIR3/4的功能分析

• 批准号: 17047012
• 负责人: 北村 俊雄
• 金额: $ 6.27万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17047012/
• 关键词: レセプター; アポトーシス; 発現クローニング; ノックアウトマウス; 免疫; 免疫レセプター; LMIR; MAIR; マスト細胞; ヒストン

研究代表者のグループは、新しいペア型Igレセプターとして、抑制型レセプターLMIR1とLMIR1に相同性の高い活性型レセプターLMIR2を同定し解析した。その後LMIR1/2の遺伝子座付近を検索することにより、新たに抑制型レセプターLMIR3と活性型レセプターLMIR4-8を同定した。本年度はLMIR3、LMIR4、LMIR5の解析を中心に行った。RT-PCRおよび作製したモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体を利用して発現分布を調べたところ、活性型レセプターLMIR4、LMIR5はマクロファージ、マスト細胞、樹状細胞などミエロイド系血液細胞に主に発現されていた。また組織では骨髄以外に肺、気管、消化管などでの発現が認められ、免疫監視なかでもinnate immunityとの関連が示唆された。LMIR4はITAMを有する活性化分子のうち、FcRγと会合するのに対して、LMIR5はDAP12と会合した。FcRγあるいはDAP12がそれぞれLMIR4あるいはLMIR5の活性化シグナルを伝達することは、ノックアウトマウスを利用した実験で確認した。つまりFcRあるいはDAP12ノックアウトマウス由来のマスト細胞に強制発現したLMIR4あるいはLMIR5を活性化して、IL-6の産生が消失することを確認した。また、lynおよびsykノックアウトマウスを利用した実験で、LMIR4、LMIR5の活性化シグナルにはこれら2つのチロシンキナーゼの存在が必須であり、その下流ではErk1/2の活性化が起こることも判明した。LMIR3をco-ligationするとLMIR4の活性化シグナルが強く抑制される。興味深いことにLMIR4のシグナルはLPS/TLR4と相乗的に働くことも明らかにした。LMIRのリガンドは未同定であるが、上記の結果はLMIRがinnate immunityに関与していることを強く示唆している。LMIR4に関する論文はJ Biol Chem誌に印刷中、LMIR5に関する論文は投稿中である。

主要研究人员小组鉴定并分析了抑制性受体LMIR1和与LMIR1高度同源的活性受体LMIR2，作为新的配对Ig受体。随后，通过围绕LMIR1/2位点的搜索，我们新鉴定了抑制性受体LMIR3和激活性受体LMIR4-8。今年，我们重点分析了 LMIR3、LMIR4 和 LMIR5。当我们使用RT-PCR研究表达分布并制备单克隆和多克隆抗体时，我们发现活性受体LMIR4和LMIR5主要表达于髓系血细胞，如巨噬细胞、肥大细胞和树突状细胞。此外，在骨髓以外的组织中也观察到表达，例如肺、气管和胃肠道，这表明与免疫监视过程中的先天免疫有关。在具有 ITAM 的激活分子中，LMIR4 与 FcRγ 相关，而 LMIR5 与 DAP12 相关。使用基因敲除小鼠的实验证实，FcRγ 或 DAP12 分别传递 LMIR4 或 LMIR5 的激活信号。换句话说，我们证实通过激活在FcR或DAP12敲除小鼠来源的肥大细胞中强制表达的LMIR4或LMIR5，可以消除IL-6的产生。此外，使用 lyn 和 syk 敲除小鼠进行的实验表明，这两种酪氨酸激酶的存在对于 LMIR4 和 LMIR5 激活信号至关重要，并且 Erk1/2 激活发生在这些酪氨酸激酶的下游。 LMIR3 的共连接强烈抑制 LMIR4 激活信号。有趣的是，我们还发现 LMIR4 信号与 LPS/TLR4 具有协同作用。尽管 LMIR 的配体尚未确定，但上述结果强烈表明 LMIR 参与先天免疫。 LMIR4的论文目前正在J Biol Chem上印刷，LMIR5的论文目前正在提交。

项目成果

Integrin αIIbβ3 induces the adhesion and activation of mast cells through interaction with fibrinogen

整合素αIIbβ3通过与纤维蛋白原相互作用诱导肥大细胞粘附和活化

• 发表时间: 2006
• 期刊: J.Immunol. 176
• 作者: Baba T;Mimura J;Nakamura N;Harada N;Yamamoto M;Morohashi K;Fujii-Kuriyama Y.;沖 俊彦;中島 秀明;中島 秀明;福地 由美;川島 敏行;沖俊彦
• 通讯作者: 沖俊彦

Immune suppressor factor confers stromal cell line with enhanced supporting activity for hematopoietic stem cells

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2005.11.146
• 发表时间: 2006-02-03
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Nakajima, H;Shibata, F;Kitamura, T
• 通讯作者: Kitamura, T

Integrin αIIbβ3 induces the adhesion and activation of mast cells through interaction with fibrinogen.

整合素αIIbβ3通过与纤维蛋白原的相互作用诱导肥大细胞的粘附和激活。

• 发表时间: 2006
• 期刊: J. Immunol. 176
• 作者: Baba T;Mimura J;Nakamura N;Harada N;Yamamoto M;Morohashi K;Fujii-Kuriyama Y.;沖 俊彦
• 通讯作者: 沖 俊彦

Disruption of Sep6, a fusion partner gene of Mixed Lineage Leukemia(MLL), does not affect the ontogeny, Leukemogenesis induced by MLL-SEPT6, or the phenotype induced by the loss of Sept4

混合谱系白血病 (MLL) 的融合伴侣基因 Sep6 的破坏不会影响个体发育、MLL-SEPT6 诱导的白血病发生或 Sept4 缺失诱导的表型

• 发表时间: 2005
• 期刊: Mol.Cell.Biol. 280
• 作者: Aoyama H;Noguchi T;Misawa T;Nakamura T;Miyachi H;Hashimoto Y;Kobayashi H;小埜良一
• 通讯作者: 小埜良一

Functional analysis of an activating receptor LMIR4 as a counterpart of an inhibitory receptor LMIR3.

激活受体 LMIR4 作为抑制性受体 LMIR3 的对应物的功能分析。

• 期刊: J. Biol. Chem. (In press)
• 作者: Baba T;Mimura J;Nakamura N;Harada N;Yamamoto M;Morohashi K;Fujii-Kuriyama Y.;沖 俊彦;中島 秀明;中島 秀明;福地 由美;川島 敏行;沖俊彦;中島秀明;小埜良一;浦野敦司;箕嶋幸範;小埜良一;伊沢 久未
• 通讯作者: 伊沢 久未