寄生性原虫の病原機構におけるメンブレントラフィックの役割

膜交通在寄生原生动物发病机制中的作用

基本信息

批准号：
16044250
负责人：
野崎智義
金额：
$ 3.9万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

腸管寄生性原虫である赤痢アメーバを感染体のモデルとして、病原微生物における小胞輸送の感染・寄生・病原性発現における役割を分子論的に解明することを目的として研究を行い、いくつかの重要な成果を挙げた。第1に精製されたファゴソーム局在タンパク質のプロテオーム解析により、病原性の異なる種・株間でのファゴソーム成熟過程の相違が明らかにされた。特に40種を越えるシステインプロテアーゼ(CP)のうちCP3とCP6のみが高い病原性を有する株にのみ見られた。第2にDNAマイクロアレイを用いたゲノムワイド遺伝子発現解析により、赤痢アメーバの病原機構に関与するユニークなRab, Arf、更に、新規の細胞傷害性因子を同定した。91個の赤痢アメーバRab遺伝子のうちRabX14,RabX31の発現のみが上昇していた。更に8種のArfのうちArfA2のみが6-25倍の発現上昇を示した。更にCP4及びCP6の遺伝子発現が6-35倍上昇していることが明らかとなった。これらのDNAマイクロアレイ解析の結果は定量リアルタイムPCRにより確認された。以上の知見はこれらの病原因子がRabX14,X31,ArfA2を介して輸送されること、更にこの輸送が病原性の発現と強く相関していることを示唆している。以上の成果により病原性と強く相関する膜輸送関連遺伝子が同定された。今後それぞれの遺伝子・タンパク質の機能を逆遺伝学的手法で解明する予定である。

我们以溶组织内阿米巴（一种肠道寄生原虫）作为感染模型，从分子角度阐明囊泡运输在病原微生物感染、寄生和致病性中的作用，取得了重大成果。首先，纯化的吞噬体定位蛋白的蛋白质组分析揭示了具有不同致病性的物种和菌株之间吞噬体成熟过程的差异。特别是，在40多种半胱氨酸蛋白酶（CP）中，只有CP3和CP6仅在高致病性菌株中发现。其次，通过使用 DNA 微阵列进行全基因组基因表达分析，我们鉴定了参与溶组织内阿米巴发病机制的独特 Rab、Arf 和新型细胞毒性因子。在91个溶组织内阿米巴Rab基因中，只有RabX14和RabX31的表达增加。此外，在八种类型的Arf中，只有ArfA2的表达增加了6-25倍。此外，还发现CP4和CP6的基因表达增加了6-35倍。这些DNA微阵列分析结果通过定量实时PCR得到证实。上述研究结果表明，这些毒力因子是通过RabX14、X31和ArfA2转运的，并且这种转运与致病性的表达强相关。上述结果导致鉴定出与致病性强相关的膜转运相关基因。未来，我们计划利用反向遗传学方法阐明每个基因和蛋白质的功能。

项目成果

期刊论文数量（27）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

The genome of the protest parasite Entamoeba histolytica

抗议寄生虫溶组织内阿米巴的基因组

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Nature 433
影响因子：
0
作者：
Loftus;B.;Anderson;I.;Davies;R.;Alismark;U.;C.M.;Samuelson;J.;Amedeo;P.;Roncaglia;P.;Berriman;M.;Hirt;R.P.;Mann;B.J.;Nozaki;T.;et al.
通讯作者：
et al.

An Intestinal Parasitic Protist Entamoeba histolytica Possesses a Non-redundant NIF-like System for Iron-Sulfur Cluster Assembly under Anaerobic Conditions.

肠道寄生原生生物溶组织内阿米巴拥有非冗余的类 NIF 系统，可在厌氧条件下组装铁硫簇。