赤痢アメーバ病原性を制御するフォスファチジルイノシトールリン酸シグナリングの解明

阐明控制溶组织内阿米巴致病性的磷脂酰肌醇磷酸信号

基本信息

批准号：
14F04414
负责人：
野崎智義
金额：
$ 1.02万
依托单位：
National Institute of Infectious Diseases
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2014
资助国家：
日本
起止时间：
2014-04-25 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

赤痢アメーバ(Entamoeba histolytica)は運動性に富み、ヒトにアメーバ症を起こす寄生性原虫である。運動や飲作用に重要なアクチン細胞骨格について細胞膜のリン脂質の一種であるホスホイノシタイド(phosphoinositieds: PPIs)による制御が知られる。本研究では赤痢アメーバPPIsによるアクチン骨格制御について、phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate (PIP3)エフェクター分子の同定と機能解析から明らかにした。PIP3結合ビーズへのアフィニティーから同定した153の赤痢アメーバPIP3結合タンパク質候補より6種類について赤痢アメーバでの発現、機能解析を行った。全ての分子はPI3Pへの結合が確認された。ここに含まれる2種類のACGファミリーのキナーゼはピノサイトーシス、赤血球の貪食、トロゴサイトーシス様の過程に関与した。さらにこれらのPHドメインのみを高発現させたところ、ひとつについて飲作用、赤血球の貪食を阻害した。ライブイメージング解析からこれはPHドメインがPIP3に強固に結合し、脱リン酸化による別のPPIへの変化が阻害されたことによると考えられた。また、もう一つのACGキナーゼは生きたCHO細胞の貪食時にトンネル様構造に局在することがライブイメージングから示された。しかしCHO死細胞や赤血球の貪食ではこのような局在は見られなかった。これは赤痢アメーバがリガンドの性質により特異的な飲作用過程を活性化する初めての知見であった。本研究は赤痢アメーバ生物学において、多様なPPIのエフェクターやそれらの機能を解析する新しい研究領域を開いた。赤痢アメーバの病原性や病理はアクチン細胞骨格とPPIに制御される運動能と貪食能に依存している。本研究の成果は多様なリガンドや病原性に対する運動や飲作用における分子機構の理解につながることが期待される。

Entamoeba Historytica是一个寄生虫，富含运动，并导致人类的变形虫。磷酸化（PPIS）的对照是一种重要的肌动蛋白细胞骨架，用于运动和饮用，是磷酸化的：PPIS，一种PPIS，一种磷酸化素辅助物质：PPIS。在这项研究中，从痢疾变形虫PPI的肌动蛋白骨骼控制已从磷脂酰肌醇3,4,5-三磷酸（PIP3）效应分子和功能分析的鉴定和功能分析中阐明。 153个痢疾变形虫PIP3结合蛋白候选物从亲和力与PIP3结合珠鉴定出来，并对六种类型的痢疾变形虫进行了功能分析。所有分子均被确认为PI3P。这里包括的两种类型的ACG家族激酶参与了Pinositeusis，红细胞和trotocytishes的过程。此外，当仅这些pH结构域表示高时，一个用于饮用和红细胞。实时成像分析表明，pH结构域与PIP3牢固结合，由于去除氧化而阻碍了对另一个PPI的变化。实时成像表明，当活细胞活细胞时，另一种ACG激酶位于隧道的结构中。但是，在CHO死细胞和红细胞中没有这样的位置。这是痢疾变形虫因配体的性质而激活特定饮酒过程的第一个知识。这项研究为各种PPI效应子和痢疾变形虫的功能开辟了一个新的研究领域。痢疾变形虫的病原体和病理学取决于肌动蛋白细胞的骨骼以及由PPI和吞噬稳定性控制的运动能力。这项研究的结果预计将导致对分子机制的理解，以实现各种配体和致病性运动和饮酒。