DNA複製関連遺伝子と発がん

DNA复制相关基因和致癌作用

基本信息

批准号：
16021239
负责人：
水島徹
金额：
$ 3.58万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16021239/
关键词：
DNA複製発がん DNAチップ複製開始反応 Rad53p

项目摘要

これまでに我々は、本研究提案を行うために必要不可欠である、DNA複製関連のヒト遺伝子のほとんどを網羅したDNAチップを企業と共同で開発した。このDNAチップは、複製開始反応に関与する遺伝子(ORC, Cdc6pをコードする遺伝子など)、複製フォークの進行に関与する遺伝子(DNAポリメラーゼをコードする遺伝子など)、複製チェックポイントに関与する遺伝子(Rad53pをコードする遺伝子など)など、約200遺伝子からなる世界で初めての複製関連遺伝子チップである(特許申請準備中)。我々はこのDNAチップを用いて、脳、肺、胃、腸、膵臓、肝臓、卵巣、子宮など様々な組織由来の株化されたがん細胞、及び臨床分離されたがん組織において、複製関連遺伝子の発現を網羅的に解析した。その結果、既に報告のあるMCM(DNAヘリカーゼ)遺伝子以外にも、正常細胞に比べがん細胞で発現が上昇している多くの複製関連遺伝子を同定した(cdt1、cdc6、dbf4、cdc45、polδなど)。我々はこれらの遺伝子の発現上昇が、細胞のがん化に寄与しているのではないかと考えている。実際これまでに、正常細胞でcdt1、及びpolδを多量発現することによりそれぞれ、.細胞増殖促進、及びクロマチンの不安定化が起こることを見出している。一方我々は、細胞のがん化に関与する複製関連遺伝子変異の同定も行っている。これまでに我々は、株化されたがん細胞、及び臨床分離されたがん組織において複数の遺伝子(orc1、orc6、cdc6、cdt1、mcm10)中に変異を発見した。その一部を正常細胞で発現して解析したところ、同定された変異orc1遺伝子の発現により過剰な複製開始がおこること、変異mcm10遺伝子の発現によりがん細胞がアポトーシス耐性になること、及び変異orc6遺伝子の発現によりがん細胞の浸潤性が亢進することを見出した.

到目前为止，我们已经开发了一个DNA芯片，该芯片涵盖了大多数重复的人类基因，这对于进行这项研究建议至关重要。该DNA芯片参与了重复的起始反应（例如编码ORC的基因CDC6P），这是一种与重复叉进度有关的基因（DNA聚合酶编码DNA聚合酶的基因），以及涉及副本的基因检查点（rad53p（rad53p）这是世界上第一个重复的遗传尖端，由约200个基因组成（例如编码基因）（为专利应用做准备）。我们使用此DNA尖端，在各种组织癌细胞中，例如大脑，肺，手势，胰腺，肝脏，卵巢，子宫和临床分离的癌组织，对基因的表达进行了全面分析。结果，除了已经报道的MCM（DNA解旋酶）基因外，与正常细胞相比，许多重复的基因在癌细胞中升高（CDT1，CDC6，DBF4，CDC45，POLΔ等）。我们认为，这些基因的兴起可能会导致细胞癌。实际上，已经发现正常细胞中CDT1和POLδ的大量CDT1和POLδ可能促进细胞生长和粘膜素。另一方面，我们还确定了与细胞癌化有关的重复基因。到目前为止，我们在库存的癌细胞和临床癌组织中发现了多个基因（ORC1，ORC6，CDC6，CDT1，MCM10）中的突变。当一部分在正常细胞中表达并分析时，鉴定出的突变体ORC1基因的表达导致过多的重复，可变的MCM10基因的表达变成了抑制性的抗凋亡性，而突变体ORC6则发现该基因的表达增加了。癌细胞的浸润。