分裂酵母の組換え修復機構を形成する遺伝子ネットワークの解析

裂殖酵母重组修复机制的基因网络分析

• 批准号: 16013241
• 负责人: 岩崎 博史
• 金额: $ 3.46万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16013241/
• 关键词: 分裂酵母; 相同組換え; DNA二重鎖切断; ゲノム安定性; Rhp51; Swi5; Sfr1; Swi2

本研究は,分裂酵母における組換え修復にかかわる遺伝子を総括的に同定し,この修復システムの全体像を解明することを目的としている.今年度は以下の研究実績をあげた.Rhp51依存的な組換え修復経路には,2つの平行な副経路(Rhp55/57経路とSfr1/Swi5経路)が存在することを明らかにした.Sfr1タンパク質は,Rhp51タンパク質及びSwi5複合体を形成し,DNA損傷で誘導されるRhp51のfocus形成に関与すること明らかにした.また,生化学的な解析から,Sfr1/Swi5は,安定なタンパク質複合体を形成し,Rhp51による試験管内組換え反応を促進することを明らかにした.その他の遺伝学的解析もふまえて,Sfr1/Swi5は,Rhp51のメディエーターであると結論された.Rhp55/57経路とSfr1/Swi5経路の機能的差異を調べる目的で,HOエンドヌクレアーゼで1ヶ所DNA二重鎖切断を誘導できるミニ染色体を有する分裂酵母株を作成して,このDNA二重鎖切断の修復産物をモニターする系を構築した.現在,このシステムを用いて解析しているところである.一方,組換え修復遺伝を同定する目的でrad2合成致死変異株のスクリーニングを行っていたが,新たな遺伝子を同定してnip1と命名して,分子遺伝学的な解析した.その結果,Nip1タンパク質は,組換え初期過程の二重鎖切断末端に作用するMRNタンパク質複合体と相互作用し,この複合体の活性を制御している因子であることが示唆された.

这项研究旨在确定与分区酵母重组和修复有关的基因，并阐明该修复系统的整体情况。 RHP55/57路由和SFR1/SWI5途径）SFR1蛋白质形成RHP51蛋白质和SWI5复合物，并且由于DNA损伤。 /SWI5形成稳定的蛋白质复合物，并根据其他遗传分析促进了测试管中的重组反应。迷你染色体可以引导一个DNA双链切割，并建立了一个使用此系统的DNA双链切割产品。但是新基因被鉴定并命名为NIP1，并在分子遗传中进行了分析，因此，NIP1蛋白与MRN蛋白质复合物相互作用，该蛋白在重组早期过程的双链切割末端。控制该复合物活性的因素。