腫瘍でのADF/チオレドキシンの活性化機構並びに抗癌剤の影響と作用機序の解析

ADF/硫氧还蛋白在肿瘤中的激活机制及抗癌药物的作用及机制分析

• 批准号: 07274109
• 负责人: 淀井 淳司
• 金额: $ 3.2万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07274109/
• 关键词: ADF; チオレドキシン; 抗癌剤; 耐性; ラジカルスカベンジャー

HTLV-I感染細胞株培養上清中より分離精製されたATL由来因子(ADF)は大腸菌の還元補酵素チオレドキシン(TRX)のヒト相同体であり、その活性部位にあるシスチン残基を介した酸化還元反応により細胞内外の酸化還元環境の維持(レドックス制御)を行っている。ADF/TRXはその還元活性により多彩な機能を有する因子として報告されているが、本研究では、ADF/TRXが多くの腫瘍組織において高発現している事実に着目し、細胞の腫瘍化とADF/TRXはじめとする細胞内レドックス制御機構との関連を解析するとともに、腫瘍細胞の抗癌剤耐性獲得におけるADF/TRXの関与について検討した。さらには、悪性腫瘍患者の血清中ADF/TRXの定量法を開発し、診断、予後判定などの臨床医学における有用性について検討した。その結果、1、シスプラチン、アドリアマイシンなどの活性酸素を産生する抗癌剤に対する耐性と細胞内ADF/TRXの発現量との間に相関を認めた。2、シスプラチン、ブレオマイシンなどの抗癌剤がADF/TRXを発現誘導することを見い出した。また、ADF/TRXを遺伝子導入した細胞株はシスプラチンに対する耐性を獲得したが、これにはADF/TRXの活性酸素消去作用が関与しているものと示唆された。3、抗ADF/TRX抗体を用いたELISAサンドウイッチ法による血清ADF/TRXの定量法を開発し、肝細胞癌患者の血清中においてADF/TRXが有意に高値を示すことを見い出した。4、活性酸素消去系酵素の発現が、癌細胞の増殖能増強、浸潤・転移能の獲得などの生物学的悪性化の進展に関与していることを見い出した。

从 HTLV-I 感染细胞系的培养上清液中分离纯化的 ATL 衍生因子 (ADF) 是大肠杆菌还原型辅酶硫氧还蛋白 (TRX) 的人类同源物，并通过其活性中的胱氨酸残基氧化。它通过还原反应维持细胞内外的氧化还原环境（氧化还原控制）。据报道，ADF/TRX 由于其还原活性而具有多种功能。在本研究中，我们重点关注 ADF/TRX 在许多肿瘤组织中高表达的事实，并且我们重点关注 ADF/TRX 的事实。我们分析了ADF/TRX与其他细胞内氧化还原控制机制之间的关系，并研究了ADF/TRX在肿瘤细胞抗癌耐药性获得中的作用。此外，我们开发了一种定量恶性肿瘤患者血清中 ADF/TRX 的方法，并研究了其在诊断和预后等临床医学中的用途。结果，我们发现对产生活性氧的抗癌药物（例如顺铂和阿霉素）的耐药性与细胞内ADF/TRX的表达水平之间存在相关性。 2.我们发现顺铂、博莱霉素等抗癌药物可诱导ADF/TRX的表达。此外，转染ADF/TRX的细胞系获得了对顺铂的耐药性，推测这与ADF/TRX的活性氧清除作用有关。 3.我们开发了一种使用抗ADF/TRX抗体的ELISA夹心法定量血清ADF/TRX的方法，发现ADF/TRX在肝细胞癌患者的血清中表现出显着高水平。 4.我们发现活性氧清除酶的表达参与了生物恶性肿瘤的进展，如癌细胞增殖能力增强、获得侵袭转移能力等。

项目成果

Sato, N.: "Thiol-mediated redox regulation of apoptosis : Possible roles of cellular thiols other than glutathione in T cell apoptosis." J. Immunol.154. 3194-3203 (1995)

Sato, N.：“硫醇介导的细胞凋亡氧化还原调节：谷胱甘肽以外的细胞硫醇在 T 细胞凋亡中的可能作用。”

Yamada, M.: "Increased expression of thioredoxin/adult T-cell leukemia derived factor in cisplation-resistant human cancer cell lines." Clin. Cancer Res.(in press.). (1996)

Yamada, M.：“顺式耐药人类癌细胞系中硫氧还蛋白/成人 T 细胞白血病衍生因子的表达增加。”

Hamada, J.: "Enhanced effect of epidermal growth factor on pulmonary metastasis and in vitro invasion of rat mammary carcinoma cells." Cancer Lett.89. 161-167 (1995)

Hamada, J.：“表皮生长因子对大鼠乳腺癌细胞肺转移和体外侵袭的增强作用。”

Sasada, T.: "Redox control of resistance to cis-Diamminedichloroplatinum (II) (CDDP): Protective effect of human thioredoxin against CDDP-induced cytotoxicity." J. Clin. Invest.(in press.). (1996)

Sasada, T.：“氧化还原控制顺式二氨二氯铂 (II) (CDDP) 耐药性：人硫氧还蛋白对 CDDP 诱导的细胞毒性的保护作用。”

Yokomizo, A.: "Cellular levels of thioredoxin associated with drug sensitivity to cisplatin, mitomycin C, doxorubicin, and etoposide." Cancer Res.55. 4293-4296 (1995)

Yokomizo, A.：“硫氧还蛋白的细胞水平与顺铂、丝裂霉素 C、阿霉素和依托泊苷的药物敏感性相关。”