ツメガエル神経形成期に発現するレチノイン酸、アクチビン応答遺伝子の分離と解析

非洲爪蟾神经发生过程中表达的视黄酸和激活素反应基因的分离和分析

基本信息

批准号：
07262229
负责人：
桃井隆
金额：
$ 1.6万
依托单位：
National Center of Neurology and Psychiatry
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07262229/
关键词：
ヘッジホッグゼグメントポラリティー遺伝子 ZPA Dhh Shh アクチビンレチノイン酸 aFGF

项目摘要

ヘッジホッグ(hh)はショウジョウバエのセグメントポラリティー遺伝子としてみいだされ、その後脊椎動物のホモローグであるSonic hedgehog(以下Shh)がマウス、ニワトリ、ゼブラフィッシュなどで分離された。マウスではShhのほかにDhhとIhhが分離されている。マウス発生過程ではShhはWhole mount In Siteによる解析で背索、Floor plateのほか肢芽ZPAに発現が観察され、運動神経系の分化、肢芽前後軸形成に関与していることがすでに明らかにされている。われわれは昨年、アフリカツメガエルXhhを分離し、アクチビンによる背索形成の過程でShhの発現が増大することを報告した。このようにShhは発現過程でさまざまな因子によりその発現が強調されていることが推察される。ラット発達過程のShhおよびDhhの発現をWhole mount In Siteで詳細に検討したところ、Dhhは心臓に一方、Shhは肺、消化管を含む上皮細胞に発現することをみいだした。さらに、肺上皮をマトリゲルに包埋し、aFGFにより肺分枝形成をおこさせ、その過程でのShhの発現を調べるとShhは分枝をおこす点で強く発現していることが明らかとなった。また、P19EC細胞がレチノイン酸により神経細胞へと分化する過程でShhの発現が観察されることから,Shh遺伝子を分離、5'上流4kbの塩基配列を解析した。その結果4kb以内にはレチノイン酸応答配列はみいだされなかった。

Hedgehog (hh) 是果蝇中的一个片段极性基因，随后在小鼠、鸡、斑马鱼和其他动物中分离出其脊椎动物同源基因 Sonic hedgehog (Shh)。除了Shh之外，Dhh和Ihh也在小鼠体内被分离出来。在小鼠发育过程中，全位点分析表明Shh在背索、底板和肢芽ZPA中表达，并且已经表明它参与运动神经系统的分化和神经系统的形成。肢芽的前后轴已经完成。去年，我们分离出了爪蟾 Xhh 并报道了在激活素诱导的背索形成过程中 Shh 表达增加。由此推断，Shh的表达在表达过程中受到多种因素的强调。使用现场整体安装对大鼠发育过程中Shh和Dhh表达的详细研究表明，Dhh在心脏中表达，而Shh在包括肺和胃肠道在内的上皮细胞中表达。此外，当将肺上皮包埋在Matrigel中并使用aFGF诱导肺分支时，检查了该过程中Shh的表达，并且明确了Shh在分支发生的点处强烈表达。此外，由于视黄酸在P19EC细胞分化为神经元的过程中观察到Shh表达，因此我们分离了Shh基因并分析了Shh基因上游4kb的核苷酸序列。结果，4kb内没有发现视黄酸反应元件。