レチノイン酸による神経細胞分化におけるCPP-32活性化と神経細胞死の分子機構

视黄酸诱导神经元分化过程中CPP-32激活和神经细胞死亡的分子机制

基本信息

批准号：
08278242
负责人：
桃井隆
金额：
$ 1.28万
依托单位：
National Center of Neurology and Psychiatry
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08278242/
关键词：
P19EC レチノイン酸 CPP32 ICE P13K ワルトマニン

项目摘要

P19EC細胞はレチノイン酸(RA)による神経細胞分化の過程で多くの細胞がDNA断片化を伴う細胞死を迎える。この細胞死の過程ではCPP32様プロテアーゼの活性化がおこること、またCPP32の特異的プロテアーゼ阻害剤により、この細胞死が抑制されることから、CPP32様プロテアーゼがRAによる神経細胞分化の過程での細胞死に関与していることがあきらかになった。そこで、P19EC細胞のcDNAライブラリーより、二つのCPP32様プロテアーゼCPP32とMch-3を分離し、InSituハイブリダイゼションにより調べて見ると、Mch-3が神経系で発現しないのに対し、CPP32はマウス胚ではDRGを含む感覚系抹消ニューロンに強く発現していた。このようにCPP32は発生過程での神経細胞死に深く関与していることが明らかとなった。また、DRGニューロン細は血清、NGFの除去やP13Kの阻害剤であるワルトマニンによりCPP32様プロテアーゼが活性化され細胞死した。P19EC細胞での細胞死もまた、ワルトマニンにより促進され、一方、bFGFはP19EC細胞でのP13K活性を促進するとともに、CPP32様プロテアーゼ活性を抑制し細胞死を抑制した。このように、神経細胞死をもたらすCPP32の活性化はP13Kにより制御されていることが明かとなった。今後最近P13Kの下流にPKBが存在し、PKBにより細胞死が抑制されることが明かにされつつある。今後、P13K、PKB、PKCとプロテアーゼカスケードの接点の解明が重要とおもわれる。

p19ec细胞通过视黄酸（RA）在神经元分化期间经历细胞死亡。这种细胞死亡过程涉及CPP32样蛋白酶的激活，而CPP32的特定蛋白酶抑制剂抑制了该细胞死亡，这清楚地表明，CPP32样蛋白酶在RA中神经元分化过程中与细胞死亡有关。因此，从p19ec细胞的cDNA库中分离了两个CPP32样蛋白酶CPP32和MCH-3，当通过initu杂交进行检查时，在神经系统中未表达MCH-3，而CPP32在包含小鼠胚胎中包含DRG的外周感官神经元中强烈表达CPP32。因此，已经揭示了CPP32在发育过程中与神经元细胞死亡深度参与。此外，DRG神经元通过清除血清和NGF以及P13K抑制剂Waltmannin去除P13K而导致细胞死亡。 Waltmannin还促进了P19EC细胞中的细胞死亡，而BFGF促进了P19EC细胞的P13K活性，并抑制了CPP32样蛋白酶活性并抑制细胞死亡。因此，揭示了导致神经元死亡的CPP32的激活受P13K调节。很明显，PKB最近位于P13K的下游，PKB抑制了细胞死亡。据认为，阐明P13K，PKB，PKC和蛋白酶级联的接触点很重要。