レチノイン酸による神経細胞分化におけるCPP-32活性化と神経細胞死の分子機構

视黄酸诱导神经元分化过程中CPP-32激活和神经细胞死亡的分子机制

基本信息

批准号：
08278242
负责人：
桃井隆
金额：
$ 1.28万
依托单位：
National Center of Neurology and Psychiatry
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08278242/
关键词：
P19EC レチノイン酸 CPP32 ICE P13K ワルトマニン

项目摘要

P19EC細胞はレチノイン酸(RA)による神経細胞分化の過程で多くの細胞がDNA断片化を伴う細胞死を迎える。この細胞死の過程ではCPP32様プロテアーゼの活性化がおこること、またCPP32の特異的プロテアーゼ阻害剤により、この細胞死が抑制されることから、CPP32様プロテアーゼがRAによる神経細胞分化の過程での細胞死に関与していることがあきらかになった。そこで、P19EC細胞のcDNAライブラリーより、二つのCPP32様プロテアーゼCPP32とMch-3を分離し、InSituハイブリダイゼションにより調べて見ると、Mch-3が神経系で発現しないのに対し、CPP32はマウス胚ではDRGを含む感覚系抹消ニューロンに強く発現していた。このようにCPP32は発生過程での神経細胞死に深く関与していることが明らかとなった。また、DRGニューロン細は血清、NGFの除去やP13Kの阻害剤であるワルトマニンによりCPP32様プロテアーゼが活性化され細胞死した。P19EC細胞での細胞死もまた、ワルトマニンにより促進され、一方、bFGFはP19EC細胞でのP13K活性を促進するとともに、CPP32様プロテアーゼ活性を抑制し細胞死を抑制した。このように、神経細胞死をもたらすCPP32の活性化はP13Kにより制御されていることが明かとなった。今後最近P13Kの下流にPKBが存在し、PKBにより細胞死が抑制されることが明かにされつつある。今後、P13K、PKB、PKCとプロテアーゼカスケードの接点の解明が重要とおもわれる。

许多 P19EC 细胞在视黄酸 (RA) 诱导的神经元分化过程中经历细胞死亡并伴有 DNA 断裂。在此细胞死亡过程中，类 CPP32 蛋白酶被激活，并且这种细胞死亡被 CPP32 特异性蛋白酶抑制剂抑制。很明显，他参与了死亡。因此，我们从P19EC细胞的cDNA文库中分离出两种CPP32样蛋白酶CPP32和Mch-3，并通过原位杂交对其进行检查。我们发现Mch-3在神经系统中不表达，而CPP32不表达在小鼠胚胎中，它在感觉周围神经元（包括 DRG）中强烈表达。因此，很明显CPP32在发育过程中深度参与神经元细胞死亡。此外，DRG 神经元因去除血清和 NGF 以及 P13K 抑制剂渥曼青霉素而激活 CPP32 样蛋白酶而死亡。渥曼青霉素也促进 P19EC 细胞中的细胞死亡，而 bFGF 则促进 P19EC 细胞中 P13K 活性并抑制 CPP32 样蛋白酶活性，从而抑制细胞死亡。因此，很明显，导致神经元细胞死亡的 CPP32 的激活是受 P13K 调节的。最近已经清楚，PKB 存在于 P13K 下游，并且 PKB 抑制细胞死亡。将来，阐明 P13K、PKB、PKC 和蛋白酶级联之间的接触点将非常重要。