ヒトの上皮系培養細胞を用いた発癌研究

使用培养的人上皮细胞进行致癌研究

• 批准号: 06281116
• 负责人: 野田 哲生
• 金额: $ 10.24万
• 依托单位: Japanese Foundation For Cancer Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06281116/
• 关键词: 子宮頸部前癌病変; ヒトケラチノサイト; テロメア短縮化; HPV16; 三次元培養系; Cre組換え酵素

本研究班は本年度も、ヒト多段階における種々の遺伝子変異の役割の解析に応用可能な、培養細胞を用いての実験系の開発を行い、以下の成果及び知見を得た。(1)増井はヒト子宮頸部上皮由来のout-growth培養系を用いることにより、偏平上皮細胞の増殖停止機構に関与する遺伝子eti-1を単離することに成功した。(2)安本はHPV16によるヒトケラチノサイト不死化の系を解析し、細胞同期に関わるp16遺伝子の不死化への関与の可能性を示した。(3)野田は、子宮頸部多段階発癌過程より多数の培養細胞系の解析から、上皮内癌の基底膜への浸潤におけるメタロプロテアーゼの関与を示した。さらにヒト由来培養細胞における遺伝子操作を容易にする、P1ファージの組換え酵素Creの遺伝子を組込んだ。アデノウイルスの作成に成功した。(4)難波と清水は、各々ヒト細胞の試験官内発癌系及び染色体移入によるヒト癌細胞の正常細胞化の系を用いることにより細胞癌化に伴うテロメア短縮化消失現象の重要性を示した。(5)許は、ヒトケラチノサイトの3次元培養系をさらに改良し、創傷治癒過程を試験官内で再現することに成功した。

今年，该研究团队继续开发利用培养细胞的实验系统，可应用于分析各种基因突变在人类多个阶段的作用，并获得以下结果和知识。 (1) 通过使用源自人宫颈上皮的生长培养系统，Masui 成功分离出与鳞状上皮细胞生长停滞机制有关的基因 eti-1。 (2)Yasumoto分析了HPV16对人角质形成细胞的永生化系统，表明参与细胞同步化的p16基因可能参与永生化。 (3)Noda通过分析大量宫颈多步癌变过程中培养的细胞系，证明了金属蛋白酶参与上皮内癌侵袭基底膜的过程。此外，还整合了 P1 噬菌体的重组酶 Cre 基因，这有助于在人源培养细胞中进行基因操作。腺病毒制备成功。 (4) Namba和Shimizu分别通过使用人类细胞体外致癌系统和通过染色体转移使人类癌细胞正常化的系统证明了与细胞癌变相关的端粒缩短和丢失现象的重要性。 （5）徐教授进一步完善了人体角质形成细胞三维培养体系，成功在体外再现了伤口愈合过程。