マウス神経系初期発生におけるPOU転写調節因子の役割の解析

POU转录调控因子在小鼠神经系统早期发育中的作用分析

基本信息

批准号：
07260215
负责人：
野田哲生
金额：
$ 3.84万
依托单位：
Japanese Foundation For Cancer Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

生体の発生・分化を制御している各種転写制御因子の中で、POUドメインと呼ばれるDNA結合領域を有する転写因子はPOU転写因子と総称されるが、本研究で我々はジーンターゲティング法を用いてクラスIIIPOU転写因子に属する4種の転写因子 (Brnl,Brn2,Brn4,Oct6) の機能解析を行っている。本年度の研究実績は以下の通りである。1) Bm2遺伝子の多角的な機能の解明 : 我々は昨年度までにBm2遺伝子マウスを樹立し、その解析からこの変異マウスでは視床下部の大細胞性ニューロンの発生が見られないことを報告している。本年度はさらに、抗Spot35抗体を用いることによりBm2変異マウスでは大細胞性ニューロンの発生が、胎生12.5日の段階で停止することを同定した。さらにRNAaseプロテクション法により、Bm2変異マウスのヘテロ接合体では、大細胞性ニューロンの産生する神経ペプチドであるバゾプレッシンとオキシトシンの転写産物量が野生型の約半分になっていることを発見した。これらの結果は、Bm2遺伝子が大細胞性ニューロンの発生から成体における機能発現までを制御していることを示すものである。2) Bm1遺伝子欠損マウスにおける海馬の構造異常の発見 :我々は昨年度までにBm1遺伝子変異マウスを樹立し、この変異マウスのホモ接合体は全て生後48時間以内に死亡することを報告した。本年度はこの変異マウスの中枢神経系の詳細な解析を行い、このマウスでは海馬のCA1及びCA2領域の層構造の形成不全が見られることを発見した。3) Bm4遺伝子欠損マウスの樹立 : 本年度我々はBm4遺伝子欠損マウスの樹立に成功した。このマウスは正常に発生し、交配も行う。しかし、詳細な解析の結果、この変異マウスは全く聴力が欠失していることが判明した。現在その機構を解析中である。

在控制生物体发育和分化的各种转录控制因子中，具有被称为POU结构域的DNA结合区域的转录因子统称为POU转录因子。我们对四种转录因子（Brnl、Brn2）进行功能分析。、Brn4、Oct6)属于III类POU转录因子。今年的研究成果如下。 1）阐明Bm2基因的多方面功能：截至去年，我们已经建立了Bm2基因小鼠，并从我们的分析中发现，在这些突变小鼠中没有观察到下丘脑大细胞神经元的发育。今年，通过使用抗Spot35抗体，我们发现Bm2突变小鼠的大细胞神经元发育在胚胎第12.5天停止。此外，利用RNA酶保护方法，他们发现在杂合Bm2突变小鼠中，加压素和催产素（大细胞神经元产生的神经肽）的转录物数量约为野生型的一半。这些结果表明，Bm2 基因控制着从大细胞神经元的发育到其在成人中的功能表达的一切。 2）Bm1基因缺陷小鼠海马结构异常的发现：去年，我们建立了Bm1基因突变小鼠，并报道该突变小鼠的纯合子在出生后48小时内全部死亡。今年，我们对这只突变小鼠的中枢神经系统进行了详细分析，发现这些小鼠的海马CA1和CA2区的层状结构存在缺陷。 3）Bm4基因缺陷小鼠的建立：今年，我们成功建立了Bm4基因缺陷小鼠。这些小鼠发育正常并交配。然而，详细分析表明，这些突变小鼠完全失聪。目前正在分析该机制。