マウス神経系初期発生におけるPOU転写調節因子の役割の解析

POU转录调控因子在小鼠神经系统早期发育中的作用分析

基本信息

批准号：
06268213
负责人：
野田哲生
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Japanese Foundation For Cancer Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

POU転写調節因子群は、哺乳類の発生において発生初期の形態形成の鍵となる遺伝子であろうと期待されている。本研究では、その中でも神経系でのみ特異的に発現しているPOU転写調節因子であるBrn4,5及び6に焦点を当て、ジーンタゲティングによりこれらの遺伝子が欠損したマウスを作成し、このマウスを解析することにより、これらの遺伝子群の機能を明らかにしてきた。本年度の主な成果は以下の通りである。1.Brn6欠損マウス既に昨年度、出生直後に致死であることが判明していたBrn6欠損マウスのホモ接合体のより詳細な解析を行った結果、これらのマウスでは視床下部の大細胞性ニューロンと小細胞性ニューロンの一部が欠如していることが判明し、このことからBrn6遺伝子産物はこれらの視床下部ニューロンの発生分化に必須であると結論された。更に、デスモプレッシン投与によりホモ接合体マウスのレスキューに成功したことより、出生直後の死因はバゾプレッシンの欠如によることも判明した。2.Brn5欠損マウスBrn5欠損マウスの脳より核抽出液を調整し、これを用いてゲルシフトアッセイ法を行い、Brn5遺伝子産物の欠如を確認した。このBrn5欠損マウスのホモ接合体は生後24時間以内に全て死亡することが判明した。現在、このマウスの死因を解明するため、中枢神経系を中心に組織学的解析を始めたところである。3.Brn5遺伝子とBrn6遺伝子の機能的代償性の解析Brn5欠損マウスとBrn6欠損マウスを交配することにより、Brn5及びBrn6が共に欠損したマウスの作出を試みたところ、このマウスも生まれてくることが確認され、これらのBrn5及び6が共に欠失しても胎児性の致死とはならないことが判明した。Brn4及びTst1遺伝子欠損マウス神経特異的POU因子であるBrn4遺伝子及びTst1遺伝子に関しては、欠損マウスの樹立に成功した。

POU转录调控基因组有望成为哺乳动物发育早期形态发生的关键基因。在本研究中，我们关注仅在神经系统中特异性表达的POU转录调节因子Brn4、5和6，并通过基因打靶创建了缺乏这些基因的小鼠，通过分析这些基因，我们阐明了这些基因的功能。基因组。今年的主要工作成果如下。 1. Brn6缺陷小鼠去年，我们对Brn6缺陷纯合子小鼠进行了更详细的分析，发现这些小鼠出生后立即死亡，一些细胞神经元缺失，从而得出Brn6基因的结论。产品对于这些下丘脑神经元的发育分化至关重要。此外，通过给予去氨加压素成功拯救纯合子小鼠表明，出生后立即死亡的原因是缺乏加压素。 2.Brn5缺陷型小鼠从Brn5缺陷型小鼠的脑中制备核提取物，并使用其进行凝胶位移测定以确认Brn5基因产物的不存在。结果发现，所有Brn5缺陷纯合小鼠在出生后24小时内死亡。目前，为了阐明这些小鼠的死亡原因，我们已经开始针对中枢神经系统进行组织学分析。 3.Brn5和Brn6基因的功能补偿分析当我们试图通过将Brn5缺陷小鼠与Brn6缺陷小鼠杂交来创建同时缺乏Brn5和Brn6的小鼠时，我们发现这些小鼠也出生了，证实了两者的缺失。 Brn5 和 6 不会导致胚胎致死。 Brn4 和 Tst1 基因缺陷型小鼠我们成功建立了 Brn4 和 Tst1 基因缺陷型小鼠，这两种基因是神经特异性 POU 因子。