チトクロ-ムPー450の分子生物学・機能の分子機構

细胞色素P-450功能的分子生物学及分子机制

• 批准号: 02217103
• 负责人: 石村 巽
• 金额: $ 33.22万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 1991
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02217103/
• 关键词: チトクロ-ムPー450; Pー450_<11β>; Pー450_<aldo>; Pー450_<14DM>; 副腎皮質ミトコンドリア; Pー450_<cam>; 部位特異的変異

1.石村らはヒトのアルドステロン合成酵素(Pー450aldo)をアルドステロン産生腫瘍から精製・分離し(63回日本生化学会発表、J.Biol.Chem.in press)、これがCYP11B2遺伝子の産物であることを示した。またラット副腎皮質球状層におけるPー450aldoの発現がアンギオテンシンIIおよびK^+により調節されることを証明した(63回日本内分泌学会発表、Endocrinology,in press)。さらに岡本らはラットPー450aldoのcDNAをCOS細胞に発現させ、そのアルドステロン合成活性を確認した(Biochem.Biophys.Res.Commun.169他)。以上によりアルドステロン合成酵素の実体と分子的性質が解明された。一方、武森らはウシ副腎皮質培養細胞系等を用いてPー450 _<17α,lyase>ならびにPー450_<c21>が関与するミクロソ-ム電子伝達系の反応を解析し、ステロイド代謝の調節機構を明らかにした(J.Steroid.Biochem.投稿中)。井柳らはPー450の酸化反応に共役するグルクロン酸転移酵素の遺伝子解析を行なった(63回日本生化学会発表)。2.北川、飯塚、森島らはそれぞれ共鳴ラマン散乱、X線吸収スペクトル、二次元NMR法を用いてP450camの構造ー活性相関を解明し、川戸らはフラッシュホトリシス偏光解消法を用いて膜中の各種Pー450の回転運動と蛋白質相互作用を測定した(J.Biochem.107他)。 吉田らは酵母Pー450_<14DM>(ラノステロ-ル14αー脱メチル化酵素)の活性中心と其質の相互作用を各種のアナログを用いて解析した(Chirality,2他)。

1。Ishimura等。来自产生醛固酮肿瘤的纯化和分离的人醛固酮合酶（P-450ALDO）（日本生物化学学会提出的第63届年度J.Biol。Chem。印刷中），表明这是CYP11B2基因的产物。它还证明，P-450Aldo在大鼠肾上腺皮层球状层中的表达受血管紧张素II和K^+的调节（第63届日本内分泌学会，内分泌学会，印刷中的第63届年度介绍）。此外，冈本及其同事在COS细胞中表达了大鼠P-450Aldo的cDNA，并确认其醛固酮合成活性（Biochem.biophys.res.res.commun.169等）。醛固酮合酶的物质和分子特性的上述阐明。同时，Takemori等人。分析了涉及P-450 _ <17α，lyase>和P-450 _ <c21>的微粒体电子传输系统的反应，并使用牛肾上腺皮质细胞系和其他细胞>揭示了调节类固醇代谢的机制（在J. staroid.biochem.BioChem.BioChem.BioChem.BioChem中）。 Iyanagi等。进行了葡萄糖醛酸转移酶的遗传分析，该酶与P-450的氧化反应（在第63届日本生化学会提出）。 2. Kitagawa，Iizuka，Morishima和其他人分别使用谐振拉曼散射，X射线吸收光谱和二维NMR阐明了p450cam的结构活性关系，以及使用P-450的旋转运动和蛋白质相互作用，使用了束闪光下的p-450。吉田等。使用各种类似物（Hailitaly，2等）分析了活性中心与其酵母P-450_ <14DM>（lanosterol14α-甲基酶）的相互作用。

项目成果

Kamiya,N.: "Heme Environmental Structure of Novel Artificial Myoglobin with Closed Heme Pocket:SiteーSpecific ChemicalーModification Producing Distal NーTetrazolyーHistydine E7 by Cyanogen Bromide and Azide Ion." The Journal of the American Chemistry. (1991)

Kamiya, N.：“具有封闭血红素袋的新型人工肌红蛋白的血红素环境结构：通过溴化氰和叠氮离子进行位点特异性化学修饰生产远端 N-四唑-组氨酸 E7”（《美国化学杂志》）。

Kaergel,E.: "Comparative Study on Cytochrome Pー450 of Yeast Using Specific Antibodies to Cytochrome Pー450_<alk> and Pー450_<14DM>" Yeast. 6. 61-67 (1990)

Kaergel，E.：“使用细胞色素 P-450_<alk> 和 P-450_<14DM> 特异性抗体对酵母细胞色素 P-450 进行比较研究”，酵母。 6. 61-67 (1990)

Egawa,T.: "Observation the OーO Stretching Raman Band for Cytochrome Pー450_<cam> under Catalytic Conditions." The Journal of Biological Chemistry. (1991)

Ekawa, T.：“在催化条件下观察细胞色素 Pー450_<cam> 的 OーO 拉伸拉曼带。”《生物化学杂志》（1991 年）。

Yoshida,Y.: "Stereoselective Interaction of an Azole Antifungal Agent with Its Target,Lanosterol 14αーDemethylase(Cytochrome Pー450_<14DM>):A Model Study with Stereoisomers of Triadimenol and Purified Cytochrome Pー450_<14DM> from Yeast" Chirality. 2. 10-15

Yoshida, Y.：“唑类抗真菌剂与其靶标羊毛甾醇 14α-脱甲基酶（细胞色素 P-450_<14DM>）的立体选择性相互作用：三唑醇立体异构体和来自酵母的纯化细胞色素 P-450_<14DM> 的模型研究”手性。2.10-15

Unno,M.: "High Pressure Laser Photolysis Study of Hemoproteins.Effects of Pressure on Carbon Monoxide Binding Dymamics for Rーand TーState Hemoglobins." Biochemistry. 29. 10199-10205 (1990)

Unno, M.：“血红蛋白的高压激光光解研究。压力对 R 态和 T 态血红蛋白一氧化碳结合动力学的影响。”29。10199-10205 (1990)。