アルツハイマ-病の大脳皮質におけるグルタミナ-ゼ免疫活性の変化

阿尔茨海默病大脑皮层谷氨酰胺酶免疫反应性的变化

基本信息

批准号：
01658508
负责人：
水野昇
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至 1990
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01658508/
关键词：
アルツハイマ-病グルタミナ-ゼ大脳皮質グルタミン酸ヒト

项目摘要

1) ラット脳のグルタミナ-ゼを精製し、それを抗原としてウサギを免疫し抗血清を得た。この抗血清はヒト脳のグルタミナ-ゼ活性を95%以上吸収できた。さらに、イムノブロッティングテストによって、この抗血清がヒト脳の分子量64,000の蛋白のみを認識することが判明した。以上の結果から、この抗ラット脳グルタミナ-ゼ抗血清はヒト脳のグルタミナ-ゼを特異的に認識すること、ヒト脳のグルタミナ-ゼは分子量64,000であること、さらにこの分子量64,000の蛋白分子以外にグルタミナ-ゼ活性を有する蛋白は5%以下の活性しか持ち得ないこと等が結論される。2) 上記の抗血清を用いてヒト脳のグルタミナ-ゼ免疫活性の分布を調べた。大脳皮質においてはBetz細胞を含む多くの錐体細胞にグルタミナ-ゼ免疫活性が認められた。この所見は、錐体細胞の多くがグルタミン酸作動性神経であるという考えと一致する。さらに、若干の非錐体細胞にもグルタミナ-ゼ免疫活性が存在した。3) アルツハイマ-病の一例において、同様の免疫組織化学的検索を行なった。角回連合野の顆粒層より上層において、グルタミナ-ゼ陽性神経細胞体数が著名に低下していた。この低下はニッスル染色像にみられた神経細胞体数の低下より激しいものであった。アルツハイマ-病脳の大脳皮質におけるグルタミナ-ゼ免疫活性の変化を、さらに症例を重ねて検索する予定である。

1）纯化大鼠脑谷氨酰胺酶，并以其为抗原免疫家兔，获得抗血清。这种抗血清能够吸收95%以上的人脑谷氨酰胺酶活性。此外，免疫印迹测试显示，这种抗血清只能识别分子量为64,000的人脑蛋白。从以上结果可以看出，这种抗大鼠脑谷氨酰胺酶抗血清特异性识别人脑谷氨酰胺酶，并且人脑谷氨酰胺酶的分子量为64,000，可以得出具有谷氨酰胺酶活性的蛋白质的活性可以小于5%。 2)使用上述抗血清研究谷氨酰胺酶免疫反应性在人脑中的分布。在大脑皮层中，在包括 Betz 细胞在内的许多锥体细胞中观察到谷氨酰胺酶免疫反应性。这一发现与许多锥体神经元是谷氨酸能神经元的观点是一致的。此外，谷氨酰胺酶免疫反应性也存在于一些非锥体细胞中。 3）在一例阿尔茨海默病病例中进行了类似的免疫组织化学研究。在角回联合区颗粒层以上层，谷氨酰胺酶阳性神经元胞体数量明显减少。这种减少比尼氏染色图像中看到的神经元细胞体数量的减少更为严重。我们计划使用更多病例来研究阿尔茨海默病患者大脑皮层谷氨酰胺酶免疫反应性的变化。