受容体よりShcを介する増殖、アポトーシス、分化の情報伝達機構の解析

Shc受体介导的增殖、凋亡、分化信息传递机制分析

• 批准号: 09273215
• 负责人: 後藤 典子
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09273215/
• 关键词: Shc; JNK; リン酸化; EGF; Ras; ERK; 細胞増殖

1.Shc-JNK pathwayの発見EGFなど増殖因子により、JNKの活性化が起こるが、そのメカニズムや生物学的役割は、不明である。我々はShcに新たなリン酸化部位Y52/56があることを示唆する結果を得た。COS細胞にShcのリン酸化部位の変異体を発現させると、EGF刺激によるJNKの活性化が、野性型Shc及びY239/240/317FShc発現細胞では強く起こるが、Y52/56FShc発現細胞ではほとんど起こらなくなった。また、EGF刺激によるERK及びp38は、Y52/56FShc発現細胞においても十分に活性化した。さらに、Y52/56FShc発現細胞は、EGFによる細胞増殖を抑制した。すなわち、EGFによるShcY52/56のリン酸化は、Ras-ERKやp38を活性化する経路とは独立した経路を介してJNKを活性化し、細胞増殖に重要な役割を果たしていることを示唆した。2.Shcと相互作用する分子の同定ShcY317には、Grb2が結合することがわかっているが、Y239/240及びY52/56に相互作用する分子は同定されていない。これらShcリン酸化部位に相互作用する分子を同定する目的で、trkAキナーゼの細胞内ドメインとShc317F(PTB+CHドメイン)とを融合させた蛋白質を酵母内で発現させ、yeast two hybrid systemを用い、マウス胎児由来cDNAライブラリーをスクリーニングした。その結果、srm tyrosine kinase,Lnk及び新規分子のcDNAが単離された。

1. Shc-JNK通路的发现 JNK被EGF等生长因子激活，但其机制和生物学作用尚不清楚。我们获得的结果表明 Shc 有一个新的磷酸化位点 Y52/56。当 COS 细胞表达 Shc 磷酸化位点的突变体时，EGF 刺激的 JNK 激活在野生型 Shc 和 Y239/240/317FShc 表达细胞中强烈发生，但在 Y52/56FShc 表达细胞中几乎不发生。此外，通过EGF刺激，ERK和p38在表达Y52/56FShc的细胞中被充分激活。此外，表达Y52/56FShc的细胞抑制EGF诱导的细胞增殖。换句话说，表明EGF对ShcY52/56的磷酸化通过独立于Ras-ERK和p38激活途径的途径激活JNK，并在细胞增殖中发挥重要作用。 2.与Shc相互作用的分子的鉴定已知Grb2与ShcY317结合，但与Y239/240和Y52/56相互作用的分子尚未被鉴定。为了鉴定与这些Shc磷酸化位点相互作用的分子，我们在酵母中表达了一种蛋白质，该蛋白质是trkA激酶的胞内结构域和Shc317F（PTB+CH结构域）的融合体，并使用了酵母二杂交系统。筛选cDNA文库。结果，分离出了srm酪氨酸激酶的cDNA、Lnk和一个新分子。

项目成果

Sato,K.-I.: "Tyrosine residue 239 and 240 of Shc are phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate-dependent phosphorylation sites by c-Src." Biochem.Biophys.Res.Commun.240巻. 399-404 (1997)

Sato, K.-I.：“Shc 的酪氨酸残基 239 和 240 是 c-Src 的磷脂酰肌醇 4,5-二磷酸依赖性磷酸化位点。” Biochem.Biophys.Res.Commun.Volume 240. 399-404 (1997)

後藤典子: "EGF受容体のシグナル伝達" 実験医学、増刊号 細胞増殖因子研究の最前線'97-'98. 15巻9号. 29-34 (1997)

Noriko Goto：“EGF 受体的信号转导”实验医学，细胞生长因子研究特刊97-98，第 15 卷，第 9. 29-34 期（1997 年）。

Gotoh,N.: "Tyrosine phosphorylation sites at amino acids 239 and 240 of Shc are involved in epidermal growth factor-induced mitogenic signaling that is distinct from Ras/mitogen-activated protein kinase activation." Mol.Cell.Biol.17巻. 1824-1831 (1997)

Gotoh, N.：“Shc 氨基酸 239 和 240 处的酪氨酸磷酸化位点参与表皮生长因子诱导的有丝分裂信号传导，这与 Ras/丝裂原激活的蛋白激酶激活不同。” 1824-1831 (1997)

後藤典子: "チロシンキナーゼと癌" 医学のあゆみ、シグナル伝達からみた癌の分子機構. 182巻1号. 4-9 (1997)

Noriko Goto：“酪氨酸激酶与癌症”从信号转导的角度研究癌症的分子机制，第 182 卷，第 1. 4-9 期（1997 年）。

後藤典子: "Shc" BioScience 用語ライブラリー 癌遺伝子・癌抑制遺伝子. 160-161 (1997)

Noriko Goto：“Shc”生物科学术语库致癌基因/肿瘤抑制基因 160-161 (1997)。