転写因子の組合せによる正と負の遺伝子発現制御

转录因子组合的正向和负向基因表达调控

基本信息

批准号：
05273218
负责人：
西沢正文
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05273218/
关键词：
転写制御転写因子クロマチンプロモーターテロメア

项目摘要

1.GAL11は遺伝子の転写活性化に必要、不必要、あるいは抑制的に働くことが知られている。この機能の違いをもたらす機構を調べるために、合成UASとコアプロモーターを組み合わせた人工プロモーターを構築し、その発現に対するGAL11の影響を調べた結果、GAL11の機能は標的プロモーターの構造と配列特異的転写活性化因子の組み合せに依存することがわかった。2.遺伝子の転写抑制機構の一つに位置効果(position effect)が知られており、酵母においてはサイレントな接合型遺伝子座やテロメアがその近傍の遺伝子の転写抑制効果を示す。テロメアのC_<1-3>A繰返し配列の隣に挿入されたURA3遺伝子の発現に対するGAL11の影響を調べた結果、GAL11がテロメアによる転写抑制に必要であること、gal11変異によりテロメアのクロマチン構造が変化することを見いだした。また接合型遺伝子座の転写抑制に関与する遺伝子(SIR遺伝子)とGAL11の相互作用を調べた結果、SIR遺伝子の一つSIR1の欠失変異をGAL11過剰生産により抑圧できることがわかった。このことはGAL11がサイレンサーによる転写抑制にも関与していることを示しており、GAL11が位置効果による酵母遺伝子の転写抑制に機能していることがわかった。3.GAL11がテロメア以外のクロマチン構造に影響するかどうかを環状プラスミドの超ラセン密度の変化とGAL11により負に制御されるプロモーターのクロマチン構造について調べた結果、gal11変異により環状プラスミドの超ラセン密度が減少すること、コアプロモーター付近のクロマチン構造が変化することを見いだし、GAL11がクロマチン構造に影響することが強く示唆された。

1.已知GAL11对于基因转录激活是必需的、非必需的或抑制性的。为了研究导致这种功能差异的机制，我们构建了一个结合了合成UAS和核心启动子的人工启动子，并研究了GAL11对其表达的影响。结果，我们发现GAL11的功能依赖于结构。研究发现，靶启动子和序列特异性转录的关系取决于激活子的组合。 2.位置效应被称为基因转录抑制机制之一，在酵母中，沉默交配型基因座和端粒对附近的基因表现出转录抑制作用。通过检查 GAL11 对插入端粒 C_<1-3>A 重复序列旁边的 URA3 基因表达的影响，我们发现 GAL11 是端粒转录抑制所必需的，并且 gal11 突变破坏了端粒的转录抑制。我发现端粒的染色质结构发生了变化。此外，通过研究GAL11与参与交配型位点转录抑制的基因（SIR基因）之间的相互作用，我们发现SIR基因之一的SIR1的缺失突变可以通过GAL11的过量产生来抑制。这表明GAL11也参与沉默子的转录抑制，并且发现GAL11通过位置效应在酵母基因的转录抑制中起作用。 3.通过检测GAL11负调控的环状质粒超螺旋密度和启动子染色质结构的变化，研究GAL11是否影响端粒以外的染色质结构。结果发现，gal11突变改变了环状质粒的超螺旋密度。我们发现 GAL11 减少并且核心启动子附近的染色质结构发生变化，强烈表明 GAL11 影响染色质结构。