ミトコンドリア病および関連疾患におけるDNA診断と病態の解明

线粒体疾病及相关疾病的DNA诊断和病理阐明

基本信息

批准号：
03265218
负责人：
宝来聰
金额：
$ 1.15万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至 1992
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03265218/
关键词：
ミトコンドリア脳筋症ミトコンドリアDNA 点突然変異 MELAS tRNA ヘテロプラスミ-

项目摘要

ミトコンドリア脳筋症は、KearnーSayre症候群を含むCPEO(chronic progressive external opthalmoplegia)、MERRF(myoclonus epilepsy associated with raggedーred fibers)およびMELAS(mitochondrial myopathy,encephalopathy,lactic acidosis strokeーlike episodes)の3型に分類される。これまでCPEOではミトコンドリアDNA(mtDNA)に欠失があることが発見され、MERRFでは、mtDNAのtRNAリジン遺伝子上の点突然変異が証明された。残るMELASに関しては、我々が昨年mtDNAのtRNAロイシン(UUR)遺伝子のDHル-プ上(塩基番号3243)の点突然変異を世界に先駆けて報告した(Nature348,1990)。その後の分析でMELAS患者40名中32名(80%)にこの変異があることが明らかとなったが、明らかにMELASと診断される残る8名には、この変異が観察されなかった。そこで、これら8名に関して、mtDNAのtRNA遺伝子をすべて含む領域の塩基配列を決定した。その結果、3名の異なる家系の患者で、新たに塩基番号3271のTからCへの点突然変異を発見した。この変異はMELASの主要な変異(塩基番号3243)と同じくtRNAロイシン(UUR)にあるが、アンチコドンステム上の変異である。ミスマッチプライマ-を用いたPCR法による簡便なDNA診断法を開発・応用したところ、他のミトコンドリア脳筋症(46名)、3243の変異のあるMELAS(32名)および正常対照群(50名)では、この変異は観察されなかった。さらに3名の患者では、正常型と変異型が混在(ヘテロプラスミィ-)することが明らかになった。以上より、tRNAロイシン(UUR)上の2種類の点突然変異が大部分(90%)のMELASの患者において、この疾患の発症と関連していることが明らかとなった。

线粒体脑病分为三种类型：CPEO（慢性进行性外部眼科杂菌），MerRF（与耐加固的纤维相关的Myoclonus癫痫）和Melas（Melas（Mitochondirial肌病），肌瘤性肌病，副酸性酸中性酸性酸性sistroke sistroke kneceare-seare kyery，包括。到目前为止，CPEO发现线粒体DNA（mtDNA）中存在缺失，并且MERRF在mtDNA的TRNA赖氨酸基因上证明了点突变。关于其余的Melas，我们首先报道了去年MtDNA Trnaleucine（UUR）基因的DH LUP（基数3243）的世界第一点突变（自然348，1990）。随后的分析表明，在40名MELAS患者中有32名（80％）存在这种突变，但未观察到剩下的8例被诊断为MELAS的患者。因此，对于这八个人，确定了包含所有mtDNA的所有tRNA基因的区域的基本序列。结果，在三个不同的家庭中发现了具有基本数字3271的新的T-C-C点突变。在trnaleucine（UUR）中发现了这种突变，类似于主要的Melas突变（碱基数3243），但是反密码子茎上的突变。当开发出一种简单的PCR方法并使用不匹配的引物应用于简单的DNA诊断方法时，在其他线粒体脑肌病（46名受试者），具有3243个突变（32名受试者）的MELAS中未观察到突变，并未观察到突变（32名受试者）和正常对照组（50受试者）。此外，三名患者发现正常形式和突变形式是混合的（异质 - ）。从上面可以看出，大多数（90％）MELAS患者的Trnaleucine（UUR）上的两个点突变与该疾病的发作有关。