Role of Ephrin-Nephrin-Neurexin complex in maintaining slit diaphragm function

Ephrin-Nephrin-Neurexin 复合物在维持裂隙隔膜功能中的作用

基本信息

批准号：
22H03086
负责人：
河内裕
金额：
$ 11.07万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H03086/
关键词：
慢性腎臓病ネフローゼ症候群蛋白尿ポドサイトスリット膜

项目摘要

蛋白尿は、腎疾患の最も重要な症候であるだけでなく、慢性腎臓病を進行させる悪化因子でもある。蛋白尿を早期に抑制することは、慢性腎臓病の進行を阻止する上で極めて重要である。研究代表者らは、腎糸球体上皮細胞（ポドサイト）の細胞間接着装置であるスリット膜が蛋白尿の発症を防ぐ最終バリア機能として機能していること、多くの腎疾患での蛋白尿はスリット膜のバリア機能の低下により発症することを明らかにしてきた。これまでの研究でEphrin-B1、Neurexinなどのシナプス関連分子がポドサイトに発現しており、スリット膜の細胞外部の主要構成分子であるネフリンと分子複合体を形成し、スリット膜の機能維持に関与していることを明らかにしてきた。本研究課題では、Ephrin-B1-ネフリン複合体はNHERF2-Ezrinを介してActin細胞骨格と結合していること、Ephrin-B1-ネフリン複合体はNeurexinと結合していることを明らかにした。初年度（令和4年度）は、Ephrin-B1-ネフリン-NHERF2-Ezrin-Actin分子連関の細胞骨格安定化における役割、ポドサイト傷害におけるこの分子連関の変化を検討した。各種病態モデルでの検討で、蛋白尿発症時、ネフリン-Ephrin-B1結合だけでなく、Ephrin-B1- NHERF2結合、NHERF2-Ezrin結合が乖離していることを明らかにした。また、Ephrin-B1のリン酸化がこれらの変化のinitiation event であることを明らかにした。また、並行してEphrin-B1-ネフリン-Neurexin複合体の役割を検討し、Neurexinがスリット膜構成分子群の発現、正常な局在の維持に重要な役割を果たしていることを明らかにした。

蛋白尿不仅是肾脏疾病最重要的症状，也是慢性肾脏病进展的加重因素。早期控制蛋白尿对于预防慢性肾脏病的进展极其重要。研究人员发现，裂隙膜是肾小球上皮细胞（足细胞）的细胞间粘附装置，具有阻止蛋白尿发生的最终屏障功能，而许多肾脏疾病中的蛋白尿都是由裂隙膜引起的。研究表明，这种疾病的发生是由于膜的屏障功能下降所致。此前的研究表明，Ephrin-B1和Neurexin等突触相关分子在足细胞中表达，它们与缝隙膜外侧的主要组成分子nephrin形成分子复合物，参与维持足细胞的功能。狭缝膜我已经说清楚了我在做什么。在这个研究项目中，我们揭示了 Ephrin-B1-nephrin 复合物通过 NHERF2-Ezrin 与肌动蛋白细胞骨架结合，并且 Ephrin-B1-nephrin 复合物与 Neurexin 结合。在第一年（Reiwa 4），我们研究了 Ephrin-B1-Nephrin-NHERF2-Ezrin-Actin 分子关联在稳定细胞骨架中的作用以及足细胞损伤期间这种分子关联的变化。使用各种病理模型的研究表明，在蛋白尿开始时，不仅去氧肾上腺素-Ephrin-B1结合，而且Ephrin-B1-NHERF2结合和NHERF2-Ezrin结合也解离。我们还发现 Ephrin-B1 磷酸化是这些变化的起始事件。与此同时，我们研究了 Ephrin-B1-nephrin-Neurexin 复合物的作用，发现 Neurexin 在构成狭缝膜的分子的表达和正常定位维持中发挥着重要作用。