標的変更による神経受容体遺伝子発現変化の解析

靶点变化引起的神经受体基因表达变化分析

基本信息

批准号：
07680834
负责人：
杉本哲夫
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Kansai Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07680834/
关键词：
μ受容体アセチルコリン神経縫合迷走神経舌下神経

项目摘要

標的変更ニューロン系の作製ラット迷走神経起始ニューロン部位(疑核及び迷走神経背側運動核)においてμオピオイド受容体の遺伝子発現を検出した(ジゴキシゲニン標識cRNAプローブを用いたin situハイブリダイゼーション法)。ついでアセチルコリン合成酵素(ChAT)の遺伝子発現を同様の手法により検出したところ、上記2核のほか舌下神経起始核にも強い発現を認めた。そこで、標的変更を施したラットでの発現変化をこれらのプローブを用いて調べた。標的変更には迷走神経と舌下神経を頚部で切断の上、迷走神経の中枢断端を舌下神経の末梢断端に端々吻合した(術後30-90日間生存)。HRPを舌筋に注入したところ、舌下神経核ニューロンは両側性に逆行標識された。さらに、吻合側の疑核と迷走神経背側運動核ニューロンの一部が逆行標識された。以上の所見は、迷走神経に線維を送るニューロンが吻合手術ののち吻合域下流で舌下神経を通り、舌に線維を送っていることを意味することから、標的変更ニューロン系として充分機能していると考えられた。標的変更ニューロン系での遺伝子発現変化の解析上記ラット(標的変更系)と迷走神経結紮を施したラット(結紮群)を用いて、μ受容体とChATそれぞれの遺伝子発現動態を追究した。μ受容体は、結紮群では結紮側の疑核及び迷走神経背側運動核において終始陰性であった。標的変更系では30日目より90日目にかけてかなりの数のニューロンに発現が回復していた。舌下神経核におけるμ受容体発現は陰性であった。ChATは、結紮群では上記のいずれの迷走神経起始核にも陰性。標的変更後ではμ受容体とほぼ同様の経過で発現が回復した。舌下神経核におけるChAT発現は多かれ少なかれ陽性であった。異種神経支配を形成した起始ニューロンにおいて遺伝子発現は回復しうることが明らかになった。

从基于神经元的大鼠杂种 - 植入神经元（怀疑和斗争神经脊柱核）制成的神经元被检测到μ阿片受体基因表达（使用Jigokishigishigenin sign crna Prove使用原位杂交方法）。然后，当通过相同方法检测到乙酰胆碱合成酶（CHAT）的基因表达时，除了上述两个核外，还发现强烈表达在低神经的核心中很强。因此，我们使用这些探针检查了用靶向大鼠在大鼠中的表达变化。目标变化是切断偏僻的神经，并用颈部进行假设，而散落神经的中央尖端最终在降压的外围端（手术后30-90天存活）。当将HRP注入舌头肌肉中时，两侧的Hypotonian神经元神经元逆行。此外，吻合术和部分神经脊柱神经元的一部分的背景被标记为逆行。上面的发现足以充当目标变化神经元系统，因为将纤维发送到偏僻的神经的神经元在吻合下通过舌头并将纤维送到舌头上。通过使用与流浪神的大鼠（结扎组）追求基因表达变化，靶变性神经系统，大鼠（目标变化系统）和大鼠（配体）的检查。在配体怀疑和背神经核的配体中，μ受体为阴性。在目标变化系统中，从第30天到第90天，该表达式已恢复到相当数量的神经元。低血分核中的μ受体表达为阴性。配体的配体组中的聊天是负面的。目标变化后，表达式在与μ受体几乎相同的过程中恢复。低位症中的聊天表达或多或少是积极的。据揭示，基因可以在形成异质神经优势的开头神经元中恢复。