ヒト・パピローマウイルスの血清型に関する研究

人乳头瘤病毒血清型研究

• 批准号: 05671348
• 负责人: 八重樫 伸生
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 1995
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05671348/
• 关键词: パピローマウイルス; HPV; 16型; 血清; E7; 免疫・グロブリン; L2; 免疫グロブリン

(1)PCR法によるHPV・DNAの検出:まず、HPVの各型間で比較的相同性の高いL1領域に対するユニヴァーサルプライマーを作成し、平成5年度に抽出した癌組織由来DNA50例、および子宮頚部異形成組織より抽出したDNA74例をそれぞれPCRで増幅した。その結果、軽度異形成では45%が陽性、、重度異形成では50%が陽性、頚癌では72%が陽性で、病変の進行とともに陽性率が増加していた。さらに16型、18型、6型、11型のE7領域をそれぞれ特異的に増幅するプライマーを作成し、先のウニヴァーサルプライマーによるPCRで陽性となった標本をそれぞれのプライマーで増幅した。その結果、軽度異形成では16型が16%、その他の型が34%、重度異形成では16型が42%、その他の型が8%、頚癌では16型が63%、その他の型が9%、であった。すなわち、病期の進行とともにHPVの検出率が増加するのは主にHPV16型の検出率が上昇するためであることが判明した。(2)HPV蛋白の抗原性(血清型)の多様性の検討:HPV・DNAの存在する検体では増幅したDNA断片を発現ベクターに組み込み、大腸菌に移入して蛋白を発現させた。現在、ウエスタンブロット法により、患者血清や頚管粘液中の免疫グロブリンとこれら蛋白抗原とを反応させ、臨床材料から得られた各ウイルス蛋白の抗原性の多様性について検討中である。(3)前年度(平成5年度)に得られた成果に関して、英文雑誌の掲載した。

（1）通过PCR方法检测HPV / DNA：首先，HPV模型之间具有相对高度同性恋的L1区域的Univerver底漆，并在1993年DNA 50病例中提取，并从不同组织中提取的宫颈颈部74例。通过PCR扩增。结果，在轻度不同的形成中，有45％为阳性，50％的严重不同形成为阳性，而癌的72％为阳性，并且随着病变的进展，正率提高。此外，创建了一个特别放大16英寸，18，6型和11英寸E7区域的底漆，并且每个底漆都会放大了早期的Univary Primer在PCR中呈阳性的主要标本。结果，轻度不同的形成16％，其他类型为34％，16种类型的严重不同形成，其他类型为8％，16％的16％，其他类型为9％。换句话说，发现随着HPV检测率的增加，HPV检测率的增加随着HPV16的速率随着阶段的进展而增加。 （2）检查HPV蛋白（血清格式）检查的多样性检查：在具有HPV和DNA的样品中，将放大的DNA片段掺入了表达载体，并将蛋白转移到大肠杆菌中。目前，蛋白质印迹方法在患者血清和宫颈粘液中的免疫球蛋白和这些蛋白抗原之间反应，并且正在研究从临床材料获得的每种病毒蛋白的抗原性能的多样性。 （3）出版了一本英语杂志，以获得上一年（1993年）获得的结果。

项目成果

Paez.C.G.: "Prevalence of Serum IgG Antibodies for the E7 and L2 Profeinsof human Papillomenirus type16 in Cervical Center Patients and Control." Tohaku.J.Exp.Med.170. 113-121 (1993)

Paez.C.G.：“颈椎中心患者和对照中人乳头状瘤病毒 16 型 E7 和 L2 抗体的血清 IgG 抗体的流行率。”