デンドリマー型光増感剤を用いた抗原導入法による樹状細胞ワクチン開発

使用树状聚合物光敏剂的抗原导入方法开发树突状细胞疫苗

基本信息

批准号：
19650122
负责人：
垣見和宏
金额：
$ 2.18万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

光増感剤と抗原を同時に樹状細胞に作用させ、エンドサイトース経路により細胞内に取り込ませた。光増感剤としては、685nmに最大吸収波長を有するデンドリマーフタロシアニン(DPc、分子量:4,903)を内包した高分子ミセルを利用した。DPc内包ミセルは、エンドサイトーシスにより細胞内に取り込まれるが、この時、光照射を行うことによってDPcより産生される一重項酸素がエンドソーム膜に障害を与え、エンドソーム内の化合物(抗原)が細胞質内に放出される仕組みである。具体的には、免疫応答の標的分子となる抗原タンパク質と共にDPc内包ミセルを樹状細胞に取り込ませた後、光刺激を加えてエンドソームに貯留している抗原を細胞質へと放出させる。本来なら、大部分の抗原はMHCクラスII経路に入り、CD4陽性T細胞を活性化する。しかし、光刺激により細胞質内に放出された抗原は、小胞体内でMHCクラスI分子に結合し、細胞表面に提示され、CD8陽性T細胞を活性化することが可能になった。C57BL/6マウスの骨髄細胞をGM-CSFとIL-4の存在下で培養し、樹状細胞に分化させて実験に用いた。樹状細胞に抗原を導入し、OT-I細胞やOT-II細胞と共培養した場合に、どちらの細胞が反応するかを観察した。樹状細胞にOVAを取り込ませた後、OT-I細胞とOT-II細胞を反応させると、樹状細胞はOT-II細胞を刺激活性化することが可能であるが、OT-I細胞を刺激する効率は非常に低かった。一方、DPc内包ミセルと光刺激処理を行った樹状細胞は、CD8陽性のOT-I細胞を効率よく刺激することが可能であった。光刺激によるエンドソームのターゲッティング技術を、抗原提示細胞内でのMHCクラスI経路とクラスII経路のターゲッティングに応用し、クロスプレゼンテーション効率を改善し、免疫応答を増強することを明らかにした。

将光敏剂和抗原同时施加到树突状细胞上，并通过内吞途径进入细胞。作为光敏剂，使用含有最大吸收波长为685nm的树枝状聚合物酞菁(DPc，分子量：4,903)的聚合物胶束。含有DPc的胶束通过胞吞作用被摄入细胞内，但此时DPc通过光照射产生的单线态氧破坏核内体膜，核内体中的化合物（抗原）被吸收到细胞质中，其机理是释放。体内。具体而言，将含有DPc的胶束与作为免疫反应靶分子的抗原蛋白一起摄入树突状细胞后，应用光刺激将储存在核内体中的抗原释放到细胞质中。正常情况下，大多数抗原进入 MHC II 类途径并激活 CD4 阳性 T 细胞。然而，通过光刺激释放到细胞质中的抗原与内质网内的MHC I类分子结合并呈递在细胞表面，从而可以激活CD8阳性T细胞。来自C57BL/6小鼠的骨髓细胞在GM-CSF和IL-4存在下培养，分化为树突状细胞，并用于实验。当树突状细胞被引入抗原并与 OT-I 和 OT-II 细胞共培养时，他们观察了哪些细胞发生了反应。当OVA被树突状细胞摄取并与OT-I细胞和OT-II细胞发生反应时，树突状细胞可以刺激并激活OT-II细胞，但不能激活OT-I细胞，刺激效率很低。另一方面，用含DPc的胶束和光刺激处理的树突状细胞能够有效地刺激CD8阳性OT-I细胞。我们应用光刺激内体靶向技术来靶向抗原呈递细胞中的 MHC I 类和 II 类通路，提高交叉呈递效率并增强免疫反应。

项目成果

期刊论文数量（8）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

癌治療におけるWOWエマルジョンの免疫賦活剤キャリアーとしての応用

WOW乳液作为免疫增强载体在癌症治疗中的应用

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
古市好宏;池内信人;森安史典;垣見和宏;垣見和宏;垣見和宏;柳衛宏宣
通讯作者：
柳衛宏宣

細胞治療の基盤と臨床応用

细胞治疗基础知识和临床应用

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
古市好宏;池内信人;森安史典;垣見和宏;垣見和宏;垣見和宏
通讯作者：
垣見和宏

Efficient Expansion and Activation of Tumor-specific CD8+T cells by Transcutaneous Peptide Immunization with TLR7 ligand and Th1 Epitope Peptide

TLR7 配体和 Th1 表位肽经皮肽免疫有效扩增和激活肿瘤特异性 CD8 T 细胞

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
李桓成;赤川英毅;本間章彦;築谷朋典;妙中義之;巽英介;細井亮宏
通讯作者：
細井亮宏

Impaired IFN-alpha production and the risk of cancer development.

干扰素-α 的产生受损，增加患癌症的风险。

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
J Interferon Gytokine Res. 12
影响因子：
0
作者：
杉浦忠男;村田知弥;小谷俊彰;湊小太郎;石井隆道;Uno K
通讯作者：
Uno K

Chemokine-mediated rapid turnover of myeloid-derived suppressor cells in tumor-bearing nice.

趋化因子介导的骨髓源性抑制细胞在荷瘤细胞中的快速周转。

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
Blood Epub
影响因子：
0
作者：
Hwansung Lee;Yoshiaki Ikeuchi;Eiki Akagawa;Eisuke Tatsumi;Yoshiyuki Taenaka;Takao Yamamoto;Sawanobori Y
通讯作者：
Sawanobori Y