鳥類代謝特性支配因子としての一酸化窒素(NO)-家禽生産機能開発の基盤-

一氧化氮（NO）作为控制禽类代谢特征的因素——家禽生产功能发育的基础——

• 批准号: 17658118
• 负责人: 秋葉 征夫
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17658118/
• 关键词: 一酸化窒素; 糖代謝; インスリン; 骨格筋; 鶏; NOC5; L-NAME; 一酸化窒素; 糖代謝; インスリン; 骨格筋; 鶏; NOC5; L-NAME

本研究では、高血糖・インスリン抵抗性などの鳥類特異的糖代謝特性を支配する要因の一つは一酸化窒素(NO)であるとの仮説を、鳥類の細胞内代謝特性とNO応答の特異性から明示することを目的とした。本年度は、鶏グルコース輸送とインスリン情報伝達系に対するNOの作用を、NO産生阻害剤を用いてin vitroで明示することを試みた。(1)鶏骨格筋細胞培養系におけるグルコース輸送に対するNO供与体添加の作用2日齢のブロイラー骨格筋(浅胸筋)より単離した筋衛星細胞を、サブコンフルエントになるまで培養し、培地血清濃度を低下させることにより分化を進行させ、筋管が成熟した約5日目のステージの細胞を用いて試験を行った。NO供与体であるNOC5を骨格筋細胞の培養培地に1〜100μMの濃度で添加し、細胞へのグルコース輸送能を非代謝性グルコースである2-Deoxyglucoseの取り込み能で評価したところ、細胞のグルコース輸送能はNOC5濃度依存的に上昇する傾向が認められた。一方、インスリン存在下(5μg/ml)では、NOC5添加によるグルコース輸送能の上昇は抑制され、NOC5 100μMの添加時のみ、若干の増加が認められたに過ぎなかった。(2)鶏骨格筋細胞培養系におけるグルコース輸送に対するNOS阻害剤添加の作用前試験と同様の培養条件下で、培地にNO合成酵素阻害剤であるL-NAMEを0〜100μMの濃度で添加し、細胞のNO産生を抑制した時のグルコース輸送能を検討した。骨格筋細胞へのL-NAME添加は、濃度依存的にグルコース輸送能を低下させる傾向を示し、50μM以上の添加では、無添加の細胞に比べ、グルコース輸送能が有意に低下した。一方、インスリン存在下(5μg/ml)では、L-NAMEの添加により、グルコース輸送能が上昇する傾向が観察された。これは、哺乳動物の骨格筋細胞とは異なるNO応答性であった。以上の結果より、鶏糖代謝にはNOが関与していることが細胞レベルでも明示され、哺乳動物とは異なる鳥類のインスリン応答性特性にも、NOが関与していることが示唆された。

在这项研究中，我们旨在阐明一个假说，即基于细胞内代谢特性的特异性，一氧化氧化物（NO）是管理鸟类特异性葡萄糖代谢特性的因素之一，例如高血糖和胰岛素抵抗，鸟类的特异性和鸟类反应。今年，我们试图清楚地证明使用NO生产抑制剂在体外对NO对鸡葡萄糖传输和胰岛素信号系统的影响。 (1) Effect of NO donors on glucose transport in chicken skeletal muscle cell culture system Muscular satellite cells isolated from broiler skeletal muscle (same-pector muscle) at 2 days old were cultured until subconfluent, and differentiation was progressed by lowering the serum concentration of the medium, and the test was performed using cells at stages about 5 days after myotubes were matured.在1至100μM的浓度下，未向骨骼肌细胞培养基中添加供体NOC5，并根据2-脱氧葡萄糖的摄取能力，非代谢性葡萄糖的摄取能力评估了葡萄糖转运能力，并且细胞在NOC5浓度依赖性依赖性依赖性浓度方面有趋势。另一方面，在存在胰岛素（5μg/mL）的情况下，抑制了NOC5引起的葡萄糖转运能力的增加，并且在添加NOC5时仅观察到略有增加。 （2）在与NOS抑制剂前的培养条件下，在鸡骨骼肌肌肉细胞培养系统中添加了葡萄糖转运的NOS抑制剂测试中，在浓度为0至100μM的L-NAME（NO NO合酶抑制剂）中，将葡萄糖转运能力添加到培养基中，并研究了细胞的无生产。与没有添加剂的细胞相比，在骨骼肌细胞中添加L-名称显示出以浓度依赖性方式降低葡萄糖转运能力的趋势，并添加50μM或更大的葡萄糖转运能力。另一方面，在存在胰岛素（5μg/mL）的情况下，通过添加L-NAME观察到增加葡萄糖转运能力的趋势。这没有反应，与哺乳动物骨骼肌细胞不同。上述结果清楚地表明，在细胞水平上，NO参与鸡肉糖代谢，这表明NO也参与了与哺乳动物不同的鸟类的胰岛素反应性。