アレルギーを誘発する環境ホルモン標的蛋白質群の機能プロテオミクス

诱发过敏的内分泌干扰物靶蛋白的功能蛋白质组学

• 批准号: 15659030
• 负责人: 植田 弘師
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659030/
• 关键词: 環境ホルモン; 神経細胞; 肥満細胞; ステロイド; G蛋白質; 微小管; 分泌; 樹状突起

本年度は、非ゲノム性の環境ホルモン作用部位として細胞膜G蛋白質連関型受容体及び微小管結合蛋白質に着目し、以下の項目について解析を行った。1.環境ホルモン作用の測定法確立肥満細胞由来株化細胞を用いた分泌評価系及びマウスを用いた末梢性疼痛試験や血管透過性増大応答評価系を用いて環境ホルモン作用測定法を確立した。神経ステロイドであるデヒドロエピアンドロステロン硫酸抱合体の作用を抑制するビスフェノールなどのアンタゴニスト型の環境ホルモン類と単独で作用を示すアトラジンのようなアゴニスト型に、細胞及び動物個体をもちいた両測定法により分類することができ、またいずれの測定法においても同じタイプに分類されることが確認された。2.細胞膜ステロイド受容体発現細胞の樹立今年度になりステロイドが作用するG蛋白質連関型受容体として魚類から3種類の受容体ファミリー・クローニングされたことが報告された。この受容体が環境ホルモン作用をも共有する細胞膜のステロイド受容体である可能性が高いと考えられるので、マウス脳で発現している相同遺伝子のcDNAを単離し、HEK293細胞に安定的に発現させた組み換えたい株を作製した。3.微小管重合を調節する神経ステロイド及び環境ホルモンの分子機構の解明MAP2の微小管結合能への影響を指標に、神経ステロイド及び環境ホルモンの分類と構造活性相関の解析を行った。MAP2依存微小管重合能に対して神経ステロイドであるプレグネノロンが重合促進作用を示し、この作用に対してビスフェノールAが拮抗的に作用することが明かとなった。一方、ノニルフェノールはインバースアゴニスト様作用を示した。現在のところアンタゴニスト様の作用を示す環境ホルモン類は確認できなかった。

今年，我们专注于细胞膜G蛋白连接的受体和微管结合蛋白作为非基因组环境激素作用位点，并分析了以下项目。 1。建立用于测量环境激素作用的方法，使用使用肥大细胞衍生的细胞系，使用小鼠的外周疼痛测试以及提高血管通透性的响应评估系统建立了环境激素作用测量。已经证实，可以将细胞和动物测定都分类为激动剂类型，例如阿特嗪类型，它们与拮抗剂型环境激素（如双苯酚）一起起作用，通过两种分析方法，都将神经类固醇脱氧核酸酯硫酸盐硫酸盐的硫酸盐硫酸盐的作用抑制了硫酸盐的硫酸盐偶联方法，并均分类为两种方法。 2。今年建立了表达细胞膜类固醇受体的表达细胞膜受体，据报道，三种类型的受体家族已从鱼类中克隆为作用于类固醇的G蛋白连接的受体。该受体很可能是细胞膜上的类固醇受体，也具有环境激素的作用，因此分离了在小鼠脑中表达的同源基因的cDNA，并在HEK293细胞中稳定地产生了重组菌株。 3。基于MAP2对微管结合能力作为索引的影响，阐明了神经类固醇和环境激素的分子机制，它们分析了神经类固醇和环境激素和结构 - 活性关系。据揭示，一种神经类固醇，对MAP2依赖性微管聚合能力表现出聚合作用的作用，而双足A A具有对这种作用的拮抗作用。另一方面，北苯酚表现出类似激动剂的效应。目前，尚未证实表现出类似拮抗作用的环境激素。

项目成果

Uchida, H. et al.: "Neurosteroid-induced hyperalgesia through a histamine release is inhibited by progesterone and p,p'-DDE, an endocrine disrupting chemical."Neurochem Int. 42・5. 401-407 (2003)

Uchida, H. 等人：“通过组胺释放引起的神经类固醇引起的痛觉过敏被黄体酮和 p,p-DDE（一种内分泌干扰物）抑制。”Neurochem Int. 42・5 (2003)。