マカク細胞から見たヒト細胞の老化と寿命

从猕猴细胞观察人类细胞的衰老和寿命

基本信息

批准号：
14654181
负责人：
石田貴文
金额：
$ 2.24万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14654181/
关键词：
不死化 p53 細胞マカク老化細胞株

项目摘要

本研究の目的は、申請者らが分離したマカク細胞系列を材料とし、細胞の老化と脱老化(不死化)の過程を調べ、マカクをヒトの細胞老化モデルとして確立し、ヒト細胞の持つ細胞死の特性を明らかにすることである。材料としては、マカク付着系細胞(線維芽細胞・上皮細胞)の初代培養から分裂停止(あるいは、不死化)に至る細胞をもちい、その性状を詳細に解析することから着手した。また系統比較のため原猿のギャラゴの付着系細胞の継代をおこなった。マカクの細胞はin vitroで培養をおこなうと一定の分裂回数の後分裂停止(M1期)に至るが、M1期を越えてさらに分裂するものが3系統あった。それらの細胞は継代後期には、いずれもp53遺伝子に異常を持っていた。突然変異の導入がp53の機能喪失をもたらすかを調べるため、下流のp21の発現を調べた。細胞にUV照射を施し、p53を誘導、p21発現誘導をmRNA発現量からモニターした。その結果、p53は機能していないことが確認され、これら細胞はp53の機能解析研究に良い材料となることが示された。一方、ギャラゴの細胞については、既に継代数は100代を越し、樹立したとみなせた。しかし、高PDL細胞は、テロメア長とその減少パタンに関しM1を越えたマカクの細胞とも異なり、更なる解析が待たれた。

这项研究的目的是，申请人被申请人分开，作为一种材料，检查细胞衰老和拆卸的过程（不朽），将makaku建立为人类细胞衰老模型，并具有人体细胞。死亡。作为一种材料，通过详细分析其特性，从Makaku附着的细胞（成纤维细胞和上皮细胞）到分裂（或不朽）的细胞到分裂（或不朽）。此外，为了进行比较，进行了猴子gallago的伴随细胞。当在体外培养时，马卡库的细胞导致了一定数量的划分（M1时期），但是有三种类型的分裂超出了M1时期。在后期，这些细胞在p53基因中都是异常的。为了研究突变的引入是否导致p53函数的丧失，检查了下游p21的表达。将紫外线照射应用于细胞，诱导p53，并从mRNA表达中监测p21诱导。结果，已经证实p53不起作用，表明这些细胞将是p53功能分析研究的好材料。另一方面，Galago细胞已被视为在第100代建立了继任的数量。但是，高PDL细胞与超过M1的链球菌及其下降的模式并进一步分析的澳门细胞不同。