中枢神経におけるEGFファミリーの発現と機能解析(脳虚血、神経細胞死におけるEGFファミリーの役割)

EGF家族在中枢神经系统中的表达及功能分析（EGF家族在脑缺血和神经元细胞死亡中的作用）

基本信息

批准号：
09771033
负责人：
三島一彦
金额：
$ 1.54万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771033/
关键词：
脳虚血神経細胞死神経栄養因子 EGF ヘパリン結合性EGF様成長因子

项目摘要

Epidermal Growth Factor(EGDファミリーに属すHeparin-binding Epidermal GrowthFactor-like Growth Factor(HB-EGF)の中枢神経での役割を解析するために、虚血脳における発.現を検討した。脳虚血モデルはラットにおける一過性心停止モデルを用い、10分虚血の後再灌流し、2時間から7日の時点で動物を屠殺し、脳切片を作成した。EGF,TGF-α,HB-EGF、EGFRのcDNAよりRNA probeを作成して、mRNA in situ hybridizationを行い脳での発現の検討をおこなった。EGFの発現は認めず、TGF-αは広範囲に発現しているものの虚血後の変化は見られなかった。一方、HB-EGFは、正常脳でも神経細胞、グリア細胞に広範囲に発現しており、虚血再潅流後に種々の部位でその発現が冗進した。海馬では歯状回、CA3 sectorで特に強く、また大脳皮質、小脳顆粒細胞でもその発現は著しく冗進した。しかし、虚血に最も脆弱な海馬CAl錐体細胞での発現亢進はなく、虚血による神経細胞死が生じた後に周囲のグリア細胞に発現が見られた。免疫組織学検討でも、それぞれの部位での蛋白の発現亢進が示唆されたが、CAlでは変化を認めなかった。これらの受容体であるEGFRの発現は主にグリア細胞に発現していたが、CA3、歯状回では神経細胞に発現し、虚血後に一過性のmRNAの発現亢進をみた。HB-EGFの中枢神経での役割はいまだ解明されていないが、虚血後に発現亢進が見られることよりストレスにより誘導される栄養因子であることが、本研究で明らかとなった。かつ、虚血脆弱性とも関連を有し、中枢神経において種々のストレスから脳を保護する役割を担っている可能性が示唆された。ただし、EGFRの神経細胞における発現は低く、今後は他の受容体(Erb-B2,B3,B4)などの検討が必

为了分析属于 EGD 家族的肝素结合表皮生长因子样生长因子 (HB-EGF) 在中枢神经系统中的作用，我们利用短暂的心脏骤停研究了其在缺血性脑中的表达。大鼠模型，缺血10分钟后对动物进行再灌注，并在2小时至7天处死动物，并从EGFR cDNA制备脑切片。我们制作了探针并进行了mRNA原位杂交来检查大脑中EGF的表达，虽然TGF-α广泛表达，但在缺血后没有观察到变化。另一方面，HB-EGF在神经元和脑中广泛表达。正常脑中存在胶质细胞，缺血再灌注后其在齿状回、CA3等多个区域表达增加。它的表达在大脑皮层和小脑颗粒细胞中特别强烈，但在最容易发生缺血的海马CA1锥体细胞中没有上调，随后在周围的胶质细胞中观察到因缺血而导致的神经元死亡。免疫组织化学研究还表明，每个区域的蛋白质表达增加，但在CA1中没有观察到变化。缺血后，这些受体EGFR的表达主要在神经胶质细胞中表达，CA3在齿状回的神经元中表达。尽管HB-EGF在中枢神经系统中的作用尚未阐明，但缺血后观察到的表达增加表明它是应激诱导的营养因子和缺血。然而，EGFR在神经细胞中的表达较低，有人认为它可能在保护大脑免受中枢神经系统的各种应激中发挥作用，需要考虑。