アンチセンス法を指向した新規な核酸類縁体の合成とその機能評価

用于反义方法的新型核酸类似物的合成及其功能评价

基本信息

批准号：
08772139
负责人：
小比賀聡
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々はアンチセンス法への展開を考え、カルバメート結合を有する新規なヌクレオシドヘテロダイマーの合成を行ないオリゴヌクレオチドへの導入を行なった。このオリゴヌクレオチド類縁体とそれに相補的なDNAあるいはRNAとの二重鎖形成能を詳細に検討したところ、このオリゴヌクレオチド類縁体はアンチセンス分子として十分な二重鎖形成能を有していることがわかった。さらにこれらの二重鎖の構造を円二色性(CD)スペクトルにより検討したところ、天然のDNA-DNAあるいはDNA-RNA二重鎖とほぼ同様の構造をとっていることが明らかとなった。また、蛇毒ホスホジエステラーゼに対する耐性能を調べたこところ、このオリゴヌクレオチド類縁体は非常に優れた酵素耐性能を有していることを見出すことができた。これらの結果から今回合成したカルバメート結合を有するオリゴヌクレオチド類縁体は優れたアンチセンス分子として期待できる。次にカルバメート結合の窒素原子上に種々機能性官能基の導入を行なうこととした。まず、オリゴヌクレオチド類縁体の脂溶性向上のため、および種々官能基の導入に伴いアンチセンス分子としての機能に変化を生じないか検討するために、カルバメート窒素原子上にメチル基を導入したヘテロダイマーの合成を行なった。このものを先と同様にオリゴヌクレオチドへ導入し、相補鎖核酸との二重鎖形成能を検討した。その結果、メチル基の導入は二重鎖形成能に全く影響を与えないことを明らかにすることができた。現在、このヘテロダイマーのカルバメート窒素原子上に各種機能性官能基の導入を行なっている。

考虑到反义方法的发展，我们合成了一种新的带有氨基甲酸酯键的核苷异二聚体，并将其引入寡核苷酸中。对这种寡核苷酸类似物与其互补DNA或RNA形成双链的能力的详细研究表明，这种寡核苷酸类似物具有足够的能力形成作为我理解的反义分子。此外，当使用圆二色性（CD）光谱检查这些双链的结构时，发现它们具有与天然DNA-DNA或DNA-RNA双链体几乎相似的结构。此外，当研究抗蛇毒磷酸二酯酶的能力时，发现该寡核苷酸类似物具有非常优异的抗酶能力。基于这些结果，本次合成的具有氨基甲酸酯键的寡核苷酸类似物有望成为优异的反义分子。接下来，我们决定在氨基甲酸酯键的氮原子上引入各种官能团。首先，为了提高寡核苷酸类似物的脂溶性并检查各种官能团的引入是否会改变作为反义分子的功能，我们创建了一种异二聚体，其中在氨基甲酸酯氮原子上引入了甲基。的合成以与之前相同的方式将该产物引入寡核苷酸，并检查其与互补链核酸形成双链的能力。结果，我们能够证明甲基的引入对形成双链的能力没有影响。目前，各种官能团被引入到该异二聚体的氨基甲酸酯氮原子上。