Src型チロシンキナーゼの大腸癌細胞増殖における役割

Src型酪氨酸激酶在结直肠癌细胞增殖中的作用

• 批准号: 08770367
• 负责人: 中村 和彦
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770367/
• 关键词: 大腸癌; チロシンキナーゼ

SrcmRNA、lckmRNA、yesmRNAの特異的な塩基配列に対して相補的な18塩基対のアンチセンスオリゴヌクレオチドと、その対照としてそれぞれのセンスオリゴヌクレオチドを作成した。オリゴヌクレオチドは、デオキシリボヌクレアーゼに耐性であるホスホロチオエ-ト化されたものを使用した。Src、Lck、Yesを種々の程度に発現している大腸癌細胞株SW620、SW480、2x10^4/100μlに各種オリゴヌクレオチドを最終濃度が0、2.5、5、10、20、40、80μMとなるように加え、5日間培養した後、細胞数をカウントした。オリゴヌクレオチドの種類にかかわらず80μM加えると、細胞増殖が軽度抑制された。これは、高濃度のオリゴヌクレオチド自身の細胞毒性と考えられた。SW620にSrcアンチセンスオリゴヌクレオチドを加えると、同濃度のセンスオリゴヌクレオチドと比較して40μMと80μMの濃度で細胞増殖の抑制が見られた。(Srcセンスオリゴヌクレオチド40μM : 2.68【.+-。】0.26,Srcアンチセンスオリゴヌクレオチド40μM :1.68【.+-。】0.20,Srcセンスオリゴヌクレオチド80μM :1.70【.+-。】0.44,Srcアンチセンスオリゴヌクレオチド80μM :0.76【.+-。】0.09,単位は全てx10^5個)これとは対照的にLckおよびYesのアンチセンスオリゴヌクレオチドはセンスオリゴヌクレオチドと比較して細胞増殖の抑制を認めなかった。SW480では各種オリゴヌクレオチド間で、細胞増殖に大きな差は見られなかった。

创建与 SrcmRNA、lckmRNA 和 yesmRNA 的特定碱基序列互补的 18 碱基对反义寡核苷酸以及每个的有义寡核苷酸作为对照。使用的寡核苷酸是硫代磷酸酯，对脱氧核糖核酸酶具有抗性。将各种寡核苷酸添加到2x10^4/100μl结直肠癌细胞系SW620和SW480中，这些细胞系不同程度地表达Src、Lck和Yes，最终浓度为0、2.5、5、10、20、40和80μM，培养5天后，计数细胞数。无论寡核苷酸的类型如何，当添加 80 μM 时，细胞增殖都会受到轻度抑制。这被认为是由于高浓度寡核苷酸本身的细胞毒性。当将Src反义寡核苷酸添加到SW620中时，与相同浓度的有义寡核苷酸相比，在40μM和80μM浓​​度下观察到细胞增殖的抑制。 （Src 有义寡核苷酸 40 μM：2.68 [.+-.] 0.26，Src 反义寡核苷酸 40 μM：1.68 [.+-.] 0.20，Src 有义寡核苷酸 80 μM：1.70 [.+-.] 0.44，Src 反义寡核苷酸 80微米：0.76【.+-.】0.09，所有单位均为x10^5）相比之下，与有义寡核苷酸相比，Lck和Yes反义寡核苷酸没有抑制细胞增殖。在SW480中，在各种寡核苷酸之间没有观察到细胞增殖的显着差异。