The novel differentiation method in pluripotent stem cells without using gene introduction or cytokine stimulation.

多能干细胞的新型分化方法，无需使用基因导入或细胞因子刺激。

• 批准号: 20H04510
• 负责人: 出沢 真理
• 金额: $ 11.32万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20H04510/
• 关键词: Muse細胞; 多能性幹細胞; 貪食; 分化; eat-me signal; 貧食

分化細胞の死細胞片の貪食によってMuse細胞は分化細胞と同じ系列の細胞に分化を開始する。貪食によって分化過程のどのレベルまで進むのかを、single cell RNA sequenceなどの方法を用いて解析した。ヒトMuse細胞に、マウス・ラット由来の心筋(中胚葉系)、神経細胞（外胚葉系）、肝細胞（内胚葉系）由来の死細胞片を貪食させて、それぞれの分化マーカーを初期、中期、後期の分化マーカーに分けて発現の有無をqPCR等で検証し、時系列に従って後期マーカーの発現まで認められた。機能性を評価するために心筋・神経の死細胞片貪食による心筋・神経分化を用いて細胞外のK+濃度を上昇させることによる脱分極と細胞内Ca2+の上昇をGCaMP-Muse細胞で計測した。その結果脱分極によってCa2+が上昇することが分かった。qPCRにおいて機能性獲得と相関するK+, Na+, Ca2+ などのチャンネルの発現も確認された。single cell RNA sequenceで未分化のヒトMuse細胞、マウス由来の心筋細胞の死細胞片を貪食させたヒトMuse細胞、そしてヒトの心筋細胞(AC16)の三者を比較検討した。その結果、心筋死細胞片を貪食したMuse細胞の遺伝子発現パターンは心臓由来の心筋細胞AC16と類似し、未分化Muse細胞とは異なるパターンを取ることがPseudotemporal depiction of heatmap、GO解析、hierarchy heatmap、Monocle trajectoryなどの解析方法で明らかになった。体性幹細胞である間葉系幹細胞(MSC)、神経幹細胞(NSC)では貪食能があることがあり、さらに死細胞片貪食によって、貪食細胞と同じ細胞種に分化した。ただMSCは軟骨、脂肪には分化したが胚葉を超えた分化はしなかった。NSCは神経系にのみ分化した。

分化细胞的死细胞碎片的吞噬作用导致缪斯细胞开始区分与分化细胞相同谱系的细胞。使用诸如单细胞RNA序列的方法分析了通过吞噬作用进行分化过程的水平。人缪缪细胞用源自心肌（中胚层），神经元（外胚层）和源自小鼠和大鼠得出的肝细胞（内胚层）的死细胞碎片吞噬细胞，并且分化标记物被分为早期，中期和晚期分化标记，以及QPCR的表达验证，并在QPCR等上进行了验证，并表达了后期的标记。为了评估功能，使用心肌和神经中死细胞碎片的吞噬吞噬吞噬吞噬细胞，使用心肌和神经分化来测量地球外K+浓度的增加和细胞内Ca2+的增加。结果，发现Ca2+由于去极化而增加。还证实了与qPCR中功能采集相关的K+，Na+和Ca2+等通道的表达。比较了三组：使用单细胞RNA序列分化的人类缪斯细胞，吞噬小鼠衍生的心肌细胞的死细胞碎片的人类缪斯细胞和人类心肌细胞（AC16）。 As a result, analysis methods such as Pseudotemporal Delayed Muse cells that phagocytes on dead myocardial cell fragments are similar to those of cardiomyocyte AC16, and have a different pattern than those of undifferentiated Muse cells, using Pseudotemporal Dependence of Heatmap, GO Analysis, hierarchy heatmap, and Monocle Trajectory revealed that the gene expression pattern of Muse cells that phagocytes从心脏来源的心肌细胞中，与心肌细胞AC16相似，并且该模式与未分化的缪斯细胞不同。体细胞间充质干细胞（MSC）和神经干细胞（NSC）可能具有吞噬能力，​​此外，它们通过吞噬作用分化为与吞噬细胞相同的细胞类型。但是，MSC分化为软骨和脂肪，但没有区分胚芽。 NSC仅分化为神经系统。

项目成果

Intravenous injection of human multilineage-differentiating stress-enduring cells alleviates mouse severe acute pancreatitis without immunosuppressants

• DOI: 10.1007/s00595-021-02382-7
• 发表时间: 2021-10-23
• 期刊: SURGERY TODAY
• 影响因子: 2.5
• 作者: Fukase, Masahiko;Sakata, Naoaki;Dezawa, Mari
• 通讯作者: Dezawa, Mari

Muse cell treatment: Next-generation medical revolution compatible with

Muse 细胞治疗：兼容的下一代医学革命

• 发表时间: 2022
• 作者: Han Yu;Hayato Watanabe;Atsushi Shimojo;Koichi Yokosawa;Mari Dezawa
• 通讯作者: Mari Dezawa

Muse細胞のもたらす医療イノベーション

Muse细胞带来的医疗创新

• 发表时间: 2021
• 作者: Eisho Kanemitsu;Xiangdong Zhao;Keiko Iwaisako;Asuka Inoue;Akihide Takeuchi;Shintaro Yagi;Hidetoshi Masumoto;Hiroaki Ohara;Motoyasu Hosokawa;Tomonari Awaya;Junken Aoki;Etsuro Hatano;Shinji Uemoto;Masatoshi Hagiwara;出沢 真理
• 通讯作者: 出沢 真理

生体に備わるMuse細胞の医療変革：アンチエージングへの貢献の可能性

Muse 细胞在体内的医学转化：有助于抗衰老的可能性

• 发表时间: 2022
• 作者: Han Yu;Hayato Watanabe;Atsushi Shimojo;Koichi Yokosawa;出沢 真理
• 通讯作者: 出沢 真理

Muse細胞がもたらす未来の医療

Muse细胞带来的未来医学

• 发表时间: 2021
• 作者: Ryoma Nakao;Hiroaki Kobayashi;Yusuke Iwabuchi;Yusuke Sasaki;Madeleine Ramstedt;Satoru Hirayama;Makoto Ohnishi;出沢 真理
• 通讯作者: 出沢 真理