培養シュワン細胞移植による損傷視神経の再生促進手段の開発
开发一种通过移植培养的雪旺细胞来促进受损视神经再生的方法
基本信息
- 批准号:09771410
- 负责人:
- 金额:$ 1.34万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1997
- 资助国家:日本
- 起止时间:1997 至 1998
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
末梢神経に含まれるシュワン細胞には視神経再生の促進作用があることを、これまで明らかにしてきた.そこで視神経の再生率の向上を計るためにシュワン細胞を単離培養し、人工的移植片を作成することを目的とした.研究方法としては新生仔ラット(Wistar種)脊髄後根神経節よりシュワン細胞を単離・培養し、細胞数約106/mlとなるように細胞外基質を80%、神経成長因子BDNF、NT-4,NGFを50ng/ml濃度にて調整し、内径1mmのシリコンチューブへの充填によって人工移植片を作成した.成熟ラット(Wistar種)の視神経を眼窩内で切断し人工移植片を眼球側視神経に移植した.る視神経再生の評価として免疫組織化学、電子顕微鏡等を用いて観察した.移植片内へのDil投与によって網膜神経節細胞を逆行性標識し、生存・再生した細胞数を無処置の対象群と比較し、生存率をMacintosh NIH imageを用いて解析した.術後2週および3週において、視神経線維が人工移植片内に伸長しているのが確認された.また、人工移植片内の神経線維にGAP43の局在を認め、L1,NCAMの細胞接着因子を発現していることがneurofilamentとの2重染色によって示された.またミエリン蛋白MAGに関しては、術後2週目以降において陽性線維が人工移植片内に確認された.電子顕微鏡では移植片内の多くの再生線維がシュワン細胞と接触しており、細胞外基質成分のなかを伸長する像は認められなかった.移植片内Dil投与による網膜神経節細胞の逆行性標識において約20%前後の生存・再生率を認めた.これらの結果より培養シュワン細胞を用いて人為的に作成した人工移植片の環境であっても視神経の再生が誘導可能であること、また末梢神経移植による再生時同様、シュワン細胞を足場として伸長しており、L1,NCAM等の細胞接着因子の発現が見られた.再生線維においてMAGの発現もあることから、人為的環境内であってもミエリン化が起きる可能性が示唆された.
到目前为止,已经揭示了周围神经中包含的雪旺细胞对促进视神经再生的作用。目的是分离和培养雪旺细胞,以提高视神经的再生速率并产生人造移植物。研究方法是将新生大鼠的背根神经节(Wisterr物种)和80%的细胞外基质,神经生长因子BDNF,NT-4和NGF分离出来,以达到约106/mL的细胞计数。通过在50 ng/ml的浓度下调节浓度并填充内径为1 mm的硅管来制备人造移植物。在轨道上切开成熟大鼠(Wisterr物种)的视神经,并将人造移植物植入眼镜神经中。使用免疫组织化学,电子显微镜等评估视神经再生。视网膜神经节细胞通过将DIL施用到移植物中逆行标记,并将生存和再生的细胞数量与未经处理的靶基组进行比较,并通过Macintosh确定了存活率。 NIH使用图像进行分析。手术后2和3周,确认视神经纤维可以在人造移植物内延伸。此外,在人造移植物内的神经纤维中观察到了GAP43的定位,并用神经丝进行双重染色表明它表达了L1和NCAM的细胞粘附因子。关于髓磷脂蛋白MAG,手术后第二周后在人造移植物中确认阳性纤维。电子显微镜表明,移植物中的许多再生纤维与Schwann细胞接触,并扩展细胞外基质成分。没有观察到图像。通过内部给药对视网膜神经节细胞的逆行标记显示出生存率和再生率约为20%。这些结果表明,即使在使用培养的Schwann细胞人为创建的人造移植环境中,也可以诱导视神经的再生,并且如周围神经移植的再生一样,schwann细胞也会以脚手架和细胞粘附因子(如L1和NCAM)的形式扩展。 MAG在再生纤维中的表达表明,即使在人工环境中,髓鞘也可能发生。
项目成果
期刊论文数量(11)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Dezawa M,et al: "Gltal cells in degenerating and regenerating optic nerve & the adult rat" Brain Research Bulletin. (in press).
Dezawa M 等人:“退化和再生视神经中的 Gltal 细胞
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- 发表时间:
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- 影响因子:0
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- 通讯作者:
M.Hatano, T.Aoki, M.Dezawa et al: "A novel pahogenesis of megacolon in Nex/Hox11L.1 dificient mice" J.Clin.Invest. 100. 795-801 (1997)
M.Hatano、T.Aoki、M.Dezawa 等人:“Nex/Hox11L.1 缺陷小鼠中巨结肠的新型发病机制”J.Clin.Invest。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Dezawa M.: "Role of schupun cells in retical ganglion cell axon regeuerostion" Progress in Retinal arel Eye Research. (in press).
Dezawa M.:“schupun 细胞在视网膜神经节细胞轴突再生中的作用”视网膜区域眼部研究进展。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
E.Eguchi, M.Dezawa, Meyer-Rocdtow VB.: "Compound eye line structure iu paralomis multispha beneclict,an anomuron half ctab from 1200m clepfin." Biol.Bull.192. 300-308 (1997)
E.Eguchi、M.Dezawa、Meyer-Rocdtow VB.:“复合眼线结构 iu paralomis multispha beneclict,来自 1200m clepfin 的 anomouron half ctab。”
- DOI:
- 发表时间:
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- 通讯作者:
Wakakua,M., Mager-Raweco,VB, M.Dezawa et al: "Selective UV-induced damage to short waveleugfh receptor cells in the eye of butteyly Paizillo xutflus" Protophasma. 200. 112-115 (1997)
Wakakua,M.、Mager-Raweco,VB、M.Dezawa 等人:“选择性紫外线诱导的 Butteyly Paizillo xutflus 眼中短波受体细胞损伤”Protophasma。
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