FGF23産生機序とリン代謝異常を基軸とする顎骨線維性骨異形成症の包括的病態理解

基于FGF23产生机制及磷代谢异常全面认识颌骨纤维性骨发育不良的病理

基本信息

批准号：
20H03894
负责人：
山口朗
金额：
$ 11.32万
依托单位：
Tokyo Dental College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20H03894/
关键词：
線維性異形成症 FGF23 Notch 線維性骨異形成症 Fibrous dysplasia GNAS リン代謝

项目摘要

本研究では、NotchシグナルによるFGF23の発現・産生制御機構を解明し、その成果をFGF23の産生異常を伴う疾患である線維性骨異形成症の病態解析に応用して、本疾患におけるNotch-FGF23 axisの役割を明らかにすることを目的とする。2021年度には以下の研究を推進した。１）培養細胞を用いた研究：FGF23産生細胞であるUMR-106骨芽細胞様細胞にNICD（Notch intracellular domain）を過剰発現させるとFGF23と共にHes1, Hey1が上昇した。また、Jag1コート培養皿で誘導された同細胞のFGF23およびHes1は、Notchシグナルにおける重要な転写因子であるRBPJκのdominant negative RBPJ (DN-RBPJ)の過剰発現で共に抑制された。２）遺伝子改変マウスを用いた研究：①Col1a1 promoterを用いたNICD Tgマウスの骨細胞、骨芽細胞の一部で、FGF23とNotch1は共発現し、これらの分子はHes1とも共発現していた。②RBPJ-κ骨細胞特異的KOマウスでは、有意に血清リン値が上昇し、骨組織におけるFGF23発現の低下傾向が確認できた。３）ヒト線維性骨異形成症の解析：①７症例の線維性骨異形成症と病理学的に診断された症例では、全ての症例で血清FGF23値が上昇していたが、血清リン値は正常値範囲であった。②４症例の線維性骨異形成症の脱灰パラフィン切片で、FGF23, Notch1, Hes1の免疫染色を行った。その結果、FDの多くの細胞でこれらの抗体に陽性の細胞が散見された。現在、蛍光免疫染色を用いてFD細胞における各分子の共発現を検討する準備を行なっている。

在本研究中，我们阐明了Notch信号传导调节FGF23表达和产生的机制，并将结果应用于纤维性骨发育不良（一种与FGF23异常产生相关的疾病）的病理分析，目的是阐明轴的作用。。 2021年，我们推进了以下研究。 1）使用培养细胞的研究：当NICD（Notch细胞内结构域）在UMR-106成骨细胞样细胞（FGF23产生细胞）中过表达时，Hes1和Hey1与FGF23一起增加。此外，在 Jag1 包被的培养皿中诱导的同一细胞中的 FGF23 和 Hes1 均因 RBPJκ（Notch 信号转导中的重要转录因子）的显性失活 RBPJ (DN-RBPJ) 过表达而受到抑制。 2）使用转基因小鼠的研究：（1）使用Col1a1启动子在NICD Tg小鼠的一些骨细胞和成骨细胞中共表达FGF23和Notch1，并且这些分子也与Hes1共表达。 (2)在RBPJ-κ骨细胞特异性KO小鼠中，血清磷水平显着升高，骨组织中FGF23表达有降低的趋势。 3）人纤维性骨发育不良分析：①病理诊断为纤维性骨发育不良的7例中，所有病例血清FGF23水平均升高，但血清磷水平均在正常范围内。 ②对4例纤维性骨发育不良的脱钙石蜡切片进行FGF23、Notch1、Hes1免疫染色。结果，发现 FD 中的许多细胞对这些抗体呈阳性。我们目前正准备使用荧光免疫染色检查 FD 细胞中每个分子的共表达。