P19细胞神经分化相关ppGalNAc-T13的功能解析

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    30970642
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    32.0万
  • 负责人：
    张延
  • 依托单位：
    上海交通大学
  • 学科分类：
    C0506.糖、脂生物化学
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2009
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

神经细胞发育分化与细胞-细胞外基质相互作用密切相关，细胞膜蛋白的糖基化参与细胞与细胞外基质的相互作用，50%以上的细胞膜蛋白为糖基化蛋白。 已有文献报道O-糖链的Core1结构对于果蝇神经发育是不可或缺的，作为细胞膜蛋白的重要的O-糖基化修饰在神经细胞发育分化过程中的机理尚不明确。本项目以小鼠P19细胞神经方向分化模型为研究对象，研究神经细胞特异性表达的O-GalNAc糖链起始反应酶的ppGalNAc-T13在细胞神经分化过程中的功能机制，寻找ppGalNAc-T13在P19细胞神经分化过程中的糖基化靶向蛋白，探究O-糖链结构及分布变化与神经细胞生长发育之间的关系，为揭示O-糖基化在神经系统发育过程中的分子作用机理奠定基础。

结项摘要

本项目以小鼠畸胎瘤细胞系P19C6体外神经诱导分化模型为研究对象，研究O-GalNAc糖链起始反应酶之一ppGalNAc-T13在神经分化过程中的功能机制，寻找T13在神经分化发育过程中的糖基化靶向蛋白，探究O-糖链结构及分布变化与神经分化之间的关系。首先我们在全反式维甲酸（ATRA）诱导下P19C6细胞的神经分化阶段以及小鼠大脑发育和原代皮层神经元成熟过程中，确认了ppGalNAc-T13的上调表达，并伴随有蛋白质O-糖基化水平的升高。同时在非诱导条件下，过表达ppGalNAc-T13的P19C6细胞形态上出现了神经突起样结构，且同样出现细胞整体O-糖基化水平上升现象。运用活体细胞代谢性标记结合二维电泳分离和点击化学反应检测的手段，我们在过表达ppGalNAc-T13的P19C6细胞中检测到O-糖基化水平升高的ppGalNAc-T13可能潜在修饰蛋白。在稳定抑制ppGalNAc-T13表达后，P19C6细胞在诱导期死亡加剧，且神经分化被抑制。免疫荧光共定位发现ppGalNAc-T13定位于细胞内质网及神经轴突中。以上研究首次观察和分析了蛋白质O-糖基化转移酶在细胞神经分化发育过程中的作用，为进一步揭示蛋白质O-糖基化在神经轴突延伸中的调控研究奠定了基础。

项目成果

期刊论文数量（2）
专著数量（0）
科研奖励数量（2）
会议论文数量（6）
专利数量（0）
Characterization of ppGalNAc-T18, a member of the vertebrate-specific Y subfamily of UDP-N-acetyl-alpha-D-galactosamine:polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferases
ppGalNAc-T18（UDP-N-乙酰基-α-D-半乳糖胺脊椎动物特异性 Y 亚家族的成员）的表征：多肽 N-乙酰基半乳糖胺基转移酶
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    Glycobiology
  • 影响因子：
    4.3
  • 作者：
    Li, Xing;Zhang, Yan;Wang, Jing;Li, Wei;Xu, Yingjiao;Shao, Dong;Xie, Yinyin;Xie, Wenxian;Kubota, Tomomi;Narimatsu, Hisashi
  • 通讯作者：
    Narimatsu, Hisashi
O-糖基化起始糖基转移酶的活性与结构研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    生命科学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    王静;彭灿;张延;WANG Jing,PENG Can,ZHANG Yan~* (Key Laboratory of
  • 通讯作者：
    WANG Jing,PENG Can,ZHANG Yan~* (Key Laboratory of

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
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          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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