A BACTERIAL FACTORY FOR PRODUCTION OF MEMBRANE PROTEINS

生产膜蛋白的细菌工厂

基本信息

批准号：
6786562
负责人：
PHILIP D LAIBLE
金额：
$ 25.65万
依托单位：
UNIVERSITY OF CHICAGO
依托单位国家：
美国
项目类别：
财政年份：
2000
资助国家：
美国
起止时间：
2000-08-01 至 2006-07-31
项目状态：
已结题

项目摘要

Description: (verbatim from the applicant's abstract) Membranes and the proteins embedded within them compartmentalize specialized machinery that provides the means by which cells and organelles communicate, generate energy, take up nutrients, excrete wastes, transduce signals by transporting metabolites between internal compartments, and build gradients of ions (and other small molecules) which are used to fuel all normal cellular activities in healthy organisms. Structural information for membrane proteins is exceedingly scarce - it is notoriously difficult to purify quantities of native material that are sufficient for crystallization attempts. Today's methods for the overproduction of protein cannot deal with membrane proteins, thus this important class is virtually ignored. In order for significant advances to be made, innovative strategies are needed rather than incremental advances in existing technology. We have exploited the unique physiology of the Rhodobacter species of photosynthetic bacteria to overexpress heterologous proteins, and have recently shown that a human outer membrane protein is expressed and incorporated into induced membranes of this organism. We now propose to develop this system to be a general one for the expression of functional membrane proteins - from any organism - in quantities that are sufficient for biochemical studies and crystallization trials for structure determination.

描述：（逐字摘自申请人的摘要）膜和嵌入其中的蛋白质将专门的机器区分开来提供细胞和细胞器通讯、产生能量的手段，吸收营养、排泄废物、通过运输转导信号内部隔室之间的代谢物，并建立离子梯度（和其他小分子），用于为所有正常细胞活动提供燃料健康的有机体。膜蛋白的结构信息非常丰富稀缺——众所周知，纯化大量天然材料非常困难这足以进行结晶尝试。今天的方法针对蛋白质的过量生产无法处理膜蛋白，因此这重要的类实际上被忽略了。为了取得重大进展制定后，需要创新战略，而不是渐进式进展现有技术。我们利用了红细菌独特的生理学光合细菌过度表达异源蛋白质，以及最近表明，人类外膜蛋白被表达并且并入该生物体的诱导膜中。我们现在建议开发该系统是功能膜表达的通用系统蛋白质 - 来自任何生物体 - 数量足以用于结构测定的生化研究和结晶试验。

项目成果

期刊论文数量（4）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Sequences of versatile broad-host-range vectors of the RK2 family.

RK2 家族的多功能广泛宿主范围载体序列。

DOI：
10.1016/s0147-619x(03)00030-1
发表时间：
2003-07-01
期刊：
Plasmid
影响因子：
2.6
作者：
H. N. Scott;P. Laible;D. Hanson
通讯作者：
D. Hanson

Towards higher-throughput membrane protein production for structural genomics initiatives.

为结构基因组学计划实现更高通量的膜蛋白生产。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
影响因子：
0
作者：
Laible, Philip D;Scott, Heather N;Henry, Lynda;Hanson, Deborah K
通讯作者：
Hanson, Deborah K

Temperature and cryoprotectant influence secondary quinone binding position in bacterial reaction centers.

温度和冷冻保护剂影响细菌反应中心的仲醌结合位置。

DOI：
发表时间：
2004-07-16
期刊：
影响因子：
3.5
作者：
Pokkuluri, P Raj;Laible, Philip D;Crawford, Adam E;Mayfield, Joy F;Yousef, Mohammed A;Ginell, Stephan L;Hanson, Deborah K;Schiffer, Marianne
通讯作者：
Schiffer, Marianne

Incorporation of selenomethionine into induced intracytoplasmic membrane proteins of Rhodobacter species.

将硒代蛋氨酸掺入红杆菌属诱导的胞质内膜蛋白中。