DNA複製ストレス応答機構に着目したBRCA2-VUS変異陽性細胞株の特徴の検証

BRCA2-VUS突变阳性细胞系特征验证，重点关注DNA复制应激反应机制

基本信息

批准号：
22K08740
负责人：
高橋麻衣子
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08740/
关键词：
遺伝性乳がん卵巣がん症候群 HBOC BRCA CRSPR-Cas9

项目摘要

狭義の遺伝性乳癌卵巣癌症候群（HBOC）はBRCA 1/2の生殖細胞系列の変異に起因するが、変異の場所と状態によってはVariants of uncertain significance (VUS)と判定されることがあり、これに対する臨床的な対応は定まっていない。個々のVUS変異がBRCA 1/2蛋白質の機能異常を生じるか否か。また、この機能異常により得られる分子生物学的な現象を同定できれば、臨床応用可能な定性的診断マーカーとしての活用の道が開けると考えられる。ゲノム不安定性の要因としてDNA複製ストレスが近年注目を集めているが、これにより生じる一本鎖DNA切断の頻度は非常に高い。そのため、我々はBRCA変異に伴う発癌プロセスにおいて、これまでに考えられてきた相同組み換え修復異常ではなく、DNA複製ストレス応答異常により、がん発症前であっても「サイレントなゲノム異常の蓄積」がDNA複製ストレス応答異常により生じていることにより、ゲノム不安定性獲得に深く関与するという独自の仮説を立てた。これにyおり、本研究を進めることで、BRCA1/2においてVUSと分類された変異が、本質的に病的変異である場合にはDNA複製ストレス応答異常という表現系を示すことが想定され、これを基にしたVUSのPathogenic/Non-Pathogenic判定、すなわちHBOC症候群診断が可能になると考えた。

狭义上的遗传性乳腺癌和卵巢癌综合征（HBOC）是由BRCA 1/2种系突变引起的，但根据突变的位置和状态，临床上可能被确定为意义不确定的变异体（VUS）。对此的回应尚未确定。单个 VUS 突变是否会导致 BRCA 1/2 蛋白功能异常。此外，如果我们能够识别这种功能异常所导致的分子生物学现象，我们相信这将为其作为可应用于临床的定性诊断标志物开辟道路。最近，DNA复制应激作为基因组不稳定的原因而受到关注，并且由该应激引起的单链DNA断裂的频率极高。因此，我们发现，在与BRCA突变相关的致癌过程中，“基因组异常的无声积累”甚至在癌症发病之前就发生了，这是由于异常的DNA复制应激反应，而不是我们之前假设的异常同源重组修复。这种现象是由异常的DNA复制应激反应引起的，并与基因组不稳定的获得密切相关。据此，通过继续进行这项研究，我们认为，BRCA1/2中被分类为VUS的突变，如果它们本质上是致病性突变，将表现出一种称为异常DNA复制应激反应的表型。据此判断致病性/非致病性VUS，即诊断HBOC综合征。