Attempt to develop novel treatment for skin pigmentation by analyzing the formation of melanophages

尝试通过分析噬黑素细胞的形成来开发治疗皮肤色素沉着的新方法

• 批准号: 22K08431
• 负责人: 吉野 三也
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08431/
• 关键词: 真皮樹状細胞; マクロファージ; 皮膚所属リンパ節; メラニン; 樹状細胞; 皮膚; 色素沈着; 抗原輸送

真皮に形成されメラニン色素を貯留したメラノファージによる、除去困難な色素沈着（シミ）を、効率的にリンパ節などへ輸送、排出する方法を探索するため、真皮の樹状細胞やマクロファージが、皮膚メラニンの捕捉や輸送にどのように関与するのかを探索することが具体的な研究目的である。中でも自己抗原の捕捉に優れる古典的樹状細胞１型（cDC1）に着目し進めている。令和4年度は、皮膚色素細胞増多症マウス２系統（Kitl-Tg、HGF-Tg）を新たに無菌化導入し、cDC1が蛍光マークされ、かつジフテリア毒素投与で特異的に除去できるXcr1-DTR-venusマウスと交配した二重変異体マウスにより、メラニンを含んだ真皮cDC1を蛍光で検出すること、および効率の良いcDC1除去の条件検討を進めた。二重変異体マウス作成の間は、Xcr1マウス単体でフローサイトメトリーによる条件検討を進め、CD11c陽性MHC classII陽性細胞を基本に、CD8a、CD103、CD11b、CD4などの発現によるXcr1陽性cDC1のキャラクターを再確認した。さらに免疫組織染色でも確認を進める。また本実験では、皮膚所属リンパ節に輸送されるメラニン量を、cDC1除去前後で比較するため、長期間のジフテリア毒素投与が必要になる。ジフテリア毒素が過量になるとマウスが死ぬため、cDC1が除去されマウスが生存できる投与量と期間の条件検討を進め、致死に至らない量で、2週間程度の継続が可能であることを確認している。今後さらに長期間の投与を検討する。この時のXcr1陽性cDC1の減少は皮膚所属リンパ節で確認しており、皮膚そのものでの細胞数変化をさらに進める。

为了探索有效运输和排出由真皮中形成并储存黑色素的噬黑细胞引起的难以去除的色素沉着（斑）的方法，我们研究了真皮树突状细胞和巨噬细胞如何能够将黑色素沉积在真皮层中。这项研究的具体目的是探索它如何参与黑色素捕获和运输。我们特别关注经典树突状细胞 1 型 (cDC1)，它在捕获自身抗原方面表现出色。 2020财年，我们引入了两种新的绝育皮肤黑素细胞增多症小鼠品系（Kitl-Tg、HGF-Tg），并使用与DTR杂交的双突变小鼠引入了具有荧光标记的cDC1并且可以通过施用白喉毒素特异性去除的Xcr1-。 -venus 小鼠，我们对含有黑色素的真皮 cDC1 进行了荧光检测，并研究了有效去除 cDC1 的条件。在双突变小鼠的产生过程中，我们仅使用Xcr1小鼠使用流式细胞术检查了条件，并基于CD11c阳性MHC II类阳性细胞，我们通过表达CD8a、CD103、CD11b、 CD4等我再确认了一下。将使用免疫组织化学染色进行进一步确认。此外，在该实验中，比较了cDC1去除前后运输到皮肤区域淋巴结的黑色素量，这需要长期施用白喉毒素。过量服用白喉毒素会杀死小鼠，因此我们研究了能够去除cDC1并使小鼠存活的剂量和周期条件，并确认在非致死剂量下可以持续约两周。是。未来我们会考虑更长期的管理。此时，在皮肤区域淋巴结中确认了Xcr1阳性cDC1的减少，进一步促进了皮肤本身细胞数量的变化。

项目成果

免疫学分野｜鳥取大学医学部生命科学科

免疫学｜鸟取大学医学院生命科学系

准教授 吉野三也（免疫学分野）｜鳥取大学医学部生命科学科

鸟取大学医学院生命科学系副教授三亚吉野（免疫学系）