がん関連血栓症における好中球細胞外トラップの役割の解明

阐明中性粒细胞胞外陷阱在癌症相关血栓形成中的作用

基本信息

批准号：
22K08175
负责人：
吉田雅幸
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08175/
关键词：
がん関連血栓慢性炎症血栓症がん好中球

项目摘要

本研究では、①がん細胞のもつ炎症惹起性および血栓誘発性に好中球NETが関与しているか？②がん細胞が好中球NETを誘発する分子機構は何か？を主題として以下のような研究を行った。がん関連血栓症; Cancer associated thrombosis, CATは臨床研究報告は散見されるが、病態解明はまだ進んでおらず、好中球やNETとの関連に関する新知見は今後の医療においても重要な示唆を与えると考えた。我々は好中球のPAD4活性化を起点とするシトルリン化が高脂肪食負荷血管炎症で重要な役割を果たすことを見出した研究成果（Osaka M, Yoshida M. et al. J Am Coll Cardiol Basic Trans Science. 2021）を踏まえ、がん関連血栓症とそこに至る血管炎症の機序解明を検討することを着想するに至った。まず、マウスメラノーマ細胞株（B16F10）を移植した野生型マウスを用いて、生体顕微鏡により大腿動脈における白血球接着現象および塩化第３鉄刺激による血栓形成をリアルタイムに観察した。塩化第３鉄刺激の濃度および時間を調整し、観察している大腿動静脈において血栓形成が誘発されることを確認した。さらに、がん移植モデル（TBM）における好中球シトルリン化誘導因子を同定するため、候補ケモカインの血中濃度をがん移植の前後で行い、分子機構を解析した。さらに、がん移植から誘導されるシトルリン化活性化機序を解明するため、PAD4をはじめとする因子のかにょを検討した。

在本研究中，我们研究了 (1) 中性粒细胞 NET 是否参与癌细胞的炎症和血栓形成特性？ ②癌细胞诱导中性粒细胞NETs的分子机制是什么？针对该主题进行了以下研究。癌症相关血栓形成 (CAT) 已在多项临床研究中得到报道，但其发病机制尚未完全阐明，有关中性粒细胞和 NET 关系的新发现对未来的医疗护理具有重要意义。我们发现中性粒细胞中 PAD4 激活引发的瓜氨酸化在高脂饮食诱发的血管炎症中起着重要作用（Osaka M, Yoshida M. et al. J Am Coll Cardiol Basic Trans Science. 2021），我们提出了这个想法研究癌症相关血栓形成的机制以及导致其的血管炎症。首先，使用移植了小鼠黑色素瘤细胞系（B16F10）的野生型小鼠，利用活体显微镜实时观察股动脉中的白细胞粘附以及氯化铁刺激引起的血栓形成。通过调节三氯化铁刺激的浓度和时间，证实在观察到的股动脉和静脉中诱导了血栓形成。此外，为了确定癌症移植模型（TBM）中诱导中性粒细胞瓜氨酸化的因素，测量了癌症移植前后候选趋化因子的血液浓度，并分析了分子机制。此外，为了阐明癌症移植诱导的瓜氨酸激活的机制，我们研究了包括PAD4在内的因素的影响。