ヘマグルチニンの抗原性多様化に対応可能なカクテル型インフルエンザワクチンの開発

开发可响应血凝素抗原多样化的鸡尾酒流感疫苗

基本信息

批准号：
22K10517
负责人：
後川潤
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kawasaki Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

インフルエンザは、人々の健康だけでなく社会活動にも影響を及ぼす深刻な感染症である。A型インフルエンザウイルスは、ウイルス表面タンパク質であるヘマグルチニン（hemagglutinin:HA）とノイラミニダーゼ（neuraminidase:NA）の種類によって亜型に分類される。A型株である2009年パンデミック型（H1N1pdm亜型）と香港型（H3N2亜型）のうち、香港型ウイルスは抗原変異頻度が特に高いため、流行株を予測して適切なワクチン株を選定することは難しい。殊に国内で承認されているインフルエンザワクチンは、その防御効果が主要抗原タンパク質であるHAの抗原性に左右される側面が大きく、ワクチン株と市中流行株の抗原相同性がずれた場合、ワクチンとしての有益性が損なわれる。本研究では抗原性のズレに対応できるHAワクチンへの改良を目的として、HAの主要抗原部位のアスパラギン結合型（N型）糖鎖に着目してN型糖鎖プロファイル（組合せと数）と抗原性との関係を明らかにし、抗原カクテル化によるHAワクチンの改良とその有効性を検証した。本年度は以下の実験を遂行した。①主要抗原部位のN型糖鎖プロファイルが異なるように設計したHA遺伝子を組み込んだプラスミドを構築し、HEK293T細胞に導入してリコンビナントHAタンパク質（rHA）を発現させた。②免疫沈降法で回収したN型糖鎖プロファイルが異なる3種類のrHAを混ぜてカクテルHA抗原とし、モルモットに免疫した。③得られた抗血清を用いて赤血球凝集抑制試験等を行い、単一HA抗血清とカクテルHA抗血清の性能を比較検証した。その結果、カクテルHA抗原によって得られた抗血清は、単一HA抗原によって得られた血清よりも広域かつ強い中和活性を示す傾向が認められた。

流感是一种严重的传染病，不仅影响人们的健康，而且影响社会活动。甲型流感病毒根据病毒表面蛋白血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）的类型分为亚型。 2009年大流行的A型毒株（H1N1pdm亚型）和香港型（H3N2亚型）中，香港型病毒的抗原突变频率特别高，因此应通过预测流行毒株来选择合适的疫苗毒株这很难。特别是，日本批准的流感疫苗的保护作用很大程度上取决于HA的抗原性，HA是主要的抗原蛋白，如果疫苗毒株与流行毒株之间的抗原同源性不同，则疫苗的用处可能如下在本研究中，我们重点关注HA主要抗原位点处的天冬酰胺连接（N型）糖链，并分析了N型糖链谱（组合和数量）和抗原，阐明了与性别的关系，并验证了抗原混合物改进HA疫苗及其有效性。今年，我们进行了以下实验。 ① 构建含有主要抗原位点具有不同N-聚糖谱的HA基因的质粒，并将其导入HEK293T细胞中以表达重组HA蛋白（rHA）。 ② 将免疫沉淀回收的三种不同N-聚糖谱的rHA混合在一起，形成鸡尾酒HA抗原，并用该混合物免疫豚鼠。 ③使用获得的抗血清，进行血凝抑制试验等，对单一HA抗血清和混合HA抗血清的性能进行比较和验证。因此，用混合HA抗原获得的抗血清往往比用单一HA抗原获得的血清表现出更广泛和更强的中和活性。