自閉症と小児知的障害の病態メカニズムの包括的解析

自闭症与儿童智力障碍病理机制综合分析

• 批准号: 13J40147
• 负责人: 浜田 奈々子
• 金额: $ 2.53万
• 依托单位: Institute for Developmental Research, Aichi Human Service Center
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J40147/
• 关键词: 神経細胞移動障害; 軸索伸長抑制; 知的障害; マリネスコシェーグレン症候群; 自閉症; SIL1; A2BP1

名古屋市立大学で知的障害が認められる女児において、Gαi2遺伝子のde novoのnonsynonymous変異が見出されたため、この分子が大脳皮質発生に果たす役割の解析を行なった。in utero electropolationにより、Gαi2をノックダウンし、導入後、3(E17), 5(P0), 12(P7)日目に仔の脳を取り出し、神経細胞の局在を観察した。E17ではノックダウンにより神経細胞移動の遅れが見られた。しかしP0,P7では目的の位置に移動を完了していたことから、Gαi2の機能抑制は大脳皮質神経細胞の移動遅延を引き起こすことが明らかになった。この遅れが、神経幹細胞の細胞周期の遅れによるものかをEdU投与、Ki67染色にて確認したところ、Gαi2のノックダウンは幹細胞の細胞周期には影響しなかった。そこで移動遅延の原因解明のために共焦点顕微鏡によるライブイメージングを行った。in utero electropolationにより、Gαi2をノックダウンし、48時間後、胎児の脳をスライスカルチャーしながら神経細胞の移動を観察した。その結果、移動中の細胞が正常な二極性形態を維持出来ず、先導突起が枝分かれした、多極性様形態をとることが観察され、その結果、細胞の移動速度が低下し、移動遅延が引き起こされることが明らかとなった。

Nagoya City University在一个智障女孩中发现了GαI2基因的Noknonynymon义突变，我们分析了该分子在脑皮质发育中的作用。在子宫电力中将GαI2击倒，在诱导后，在第3天（E17），5（P0）和12（P7）中去除幼犬大脑，以观察神经元的定位。在E17，敲低显示神经元迁移的延迟。但是，由于该运动以P0和P7的到预期位置完成，因此揭示了GαI2功能的抑制导致脑皮质神经元的迁移延迟。当我们确认使用EDU给药和Ki67染色的神经干细胞细胞细胞周期延迟引起的延迟时，GαI2的敲低不会影响干细胞的细胞周期。因此，使用共聚焦显微镜进行实时成像以确定运动延迟的原因。 GαI2在子宫电力中被击倒，48小时后，切成胎儿脑时观察到神经元迁移。结果，观察到迁移的细胞无法维持其正常的双相形态，并且领先的突起采用了多极形态，从而降低了细胞迁移速度并引起迁移延迟。

项目成果

Rbfox1, an autism causal gene, plays an essential role in cortical development

Rbfox1 是一种自闭症致病基因，在皮质发育中发挥着重要作用

• 发表时间: 2015
• 作者: 浜田奈々子;伊東秀記;田畑秀典;永田浩一
• 通讯作者: 永田浩一

Analysis of cortical development defects using time-lapse imaging

使用延时成像分析皮质发育缺陷

• 发表时间: 2014
• 作者: 浜田奈々子;稲熊裕;田畑秀典;西村嘉明;伊東秀記;水野誠;大野欽司;永田浩一
• 通讯作者: 永田浩一

自閉症・知的障害原因遺伝子A2BP1の大脳皮質形成における機能解析

自闭症/智力障碍基因A2BP1在大脑皮层形成中的功能分析

• 发表时间: 2014
• 作者: 浜田奈々子;伊東秀記;田畑秀典;永田浩一
• 通讯作者: 永田浩一

Role of the cytoplasmic isoform of RBFOX1/A2BP1 in establishing the architecture of the developing cerebral cortex.

• DOI: 10.1186/s13229-015-0049-5
• 发表时间: 2015
• 期刊: Molecular autism
• 影响因子: 6.2
• 作者: Hamada N;Ito H;Iwamoto I;Morishita R;Tabata H;Nagata K
• 通讯作者: Nagata K

Biochemical and morphological characterization of A2BP1 in the neuronal tissue

神经元组织中 A2BP1 的生化和形态学特征

• 发表时间: 2013
• 作者: Nagata K;Hamada N;Ito H;Iwamoto I;Mizuno M;Morishita R;Inaguma Y;Tabata H
• 通讯作者: Tabata H