脳虚血、大脳白質病変における神経軸索伸長阻害因子抑制の効果に関する研究

抑制神经轴突生长抑制剂对脑缺血及脑白质病变的影响研究

• 批准号: 16790813
• 负责人: 小久保 安昭
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790813/
• 关键词: 慢性脳虚血; oligodendrocyte; axon; glial progenitor; 大脳白質; leukoaraiosis

慢性脳虚血モデルはSDラット(雄210-250g)を用いて永久両側総頚動脈閉塞を行い作製し、術後2、4、6、8週の4群に分類した。脳組織評価は、bregmaより0.30mm後方の冠状断、スライス厚20μmの脳切片を作成し、抗NG2抗体(oligodendrocyte progenitor cell : OPCのマーカー)及び、抗GST-π抗体(mature oligodendrocyte : OLGのマーカー)を用いた免疫組織化学染色によって行った。また、corpus callosumおける一視野(×400)のNG2陽性細胞数、GST-π陽性細胞数を評価し比較検討した(n=6)。認知機能の評価は、各群のsacrifice前5日間水迷路試験によって行った(n=10-14)。運動機能の評価は、Rotarod試験を用い、術前連続した3日間と術後1、3、5日後及び1-8週間目まで各週行った(n=6)。免疫組織化学染色の結果、虚血群におけるNG2陽性細胞数は、対照群に比べ4週で有意に増加しており(P<0.05)、その後も増加の傾向を示した。虚血群におけるGST-π陽性細胞数は、対照群に比べ減少の傾向が見られ、2週では有意に低下を示した(P<0.05)。水迷路試験の結果、虚血群は対照群に比べ有意に成績が低下していた。虚血群間で比較すると虚血群間では6週が低い傾向であった。Rotarod試験の結果、虚血群は対照群に比べ2-3週まででやや低下が見られるものの明確な差は見られなかった。以上の結果は、慢性脳虚血モデルにおけるOPC、OLGの動態と脳機能障害との関連について初めて検討したものであり、本モデルにおいて、OLGの減少のピークは術後2週、OPCの増加のピークは術後4週であり、OLGは4週にはSham群と同程度にまで回復することが考えられた。脳機能障害については、運動機能低下は認めなかったが認知機能低下を認め、術後6週で最低の傾向であったことから、組織学的にOLGは減少後回復を認めたものの、認知機能障害は残存することが示唆された。

使用SD大鼠（雄性210-250G）制备慢性脑缺血模型，并接受永久性双侧共同颈动脉闭塞，并在术后2、4、6和8周分类为四组。使用抗NG2抗体（少突胶质细胞祖细胞：OPC的标记）和抗GST-π抗体（成熟的少突胶质细胞：OLG的标记物），通过免疫组织化学染色（少突胶质细胞祖细胞：OPC标记：OLG）通过免疫组织化学染色进行评估。此外，评估并比较了callosum callosum中的视野（x400）中NG2阳性细胞和GST-π阳性细胞的数量（n = 6）。认知功能评估是在牺牲前的5天通过水迷宫测试进行的5天（n = 10-14）。使用Rotarod测试对运动功能进行评估，并在手术前连续3天，手术后1、3、5天和手术后1-8周进行运动功能（n = 6）。免疫组织化学染色表明，与对照组相比，缺血组的NG2阳性细胞数量显着增加（p <0.05），此后存在增加的趋势。与对照组相比，缺血组中GST-π阳性细胞的数量显示出降低的趋势，并且在2周时显示出显着减少（P <0.05）。水迷宫测试的结果表明，缺血组的结果明显低于对照组。与缺血群相比，缺血群中的6周趋势较低。 Rotarod研究表明，尽管缺血组比对照组的2-3周略有下降，但尚未观察到明显的差异。以上结果是第一个检查慢性脑缺血模型中OPC和OLG动力学之间的关系的结果，人们认为，在该模型中，OLG的峰值降低是手术后2周，OPC的峰值增加是手术后4周，而OLG在4周时将与SHAM组相同。关于脑功能障碍，未观察到运动不足，但是观察到认知不足，并且该趋势是手术后6周的最低趋势，这表明尽管OLG在组织学结果降低后恢复了，但仍然存在认知功能障碍。