脳虚血、大脳白質病変における神経軸索伸長阻害因子抑制の効果に関する研究

抑制神经轴突生长抑制剂对脑缺血及脑白质病变的影响研究

• 批准号: 16790813
• 负责人: 小久保 安昭
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790813/
• 关键词: 慢性脳虚血; oligodendrocyte; axon; glial progenitor; 大脳白質; leukoaraiosis

慢性脳虚血モデルはSDラット(雄210-250g)を用いて永久両側総頚動脈閉塞を行い作製し、術後2、4、6、8週の4群に分類した。脳組織評価は、bregmaより0.30mm後方の冠状断、スライス厚20μmの脳切片を作成し、抗NG2抗体(oligodendrocyte progenitor cell : OPCのマーカー)及び、抗GST-π抗体(mature oligodendrocyte : OLGのマーカー)を用いた免疫組織化学染色によって行った。また、corpus callosumおける一視野(×400)のNG2陽性細胞数、GST-π陽性細胞数を評価し比較検討した(n=6)。認知機能の評価は、各群のsacrifice前5日間水迷路試験によって行った(n=10-14)。運動機能の評価は、Rotarod試験を用い、術前連続した3日間と術後1、3、5日後及び1-8週間目まで各週行った(n=6)。免疫組織化学染色の結果、虚血群におけるNG2陽性細胞数は、対照群に比べ4週で有意に増加しており(P<0.05)、その後も増加の傾向を示した。虚血群におけるGST-π陽性細胞数は、対照群に比べ減少の傾向が見られ、2週では有意に低下を示した(P<0.05)。水迷路試験の結果、虚血群は対照群に比べ有意に成績が低下していた。虚血群間で比較すると虚血群間では6週が低い傾向であった。Rotarod試験の結果、虚血群は対照群に比べ2-3週まででやや低下が見られるものの明確な差は見られなかった。以上の結果は、慢性脳虚血モデルにおけるOPC、OLGの動態と脳機能障害との関連について初めて検討したものであり、本モデルにおいて、OLGの減少のピークは術後2週、OPCの増加のピークは術後4週であり、OLGは4週にはSham群と同程度にまで回復することが考えられた。脳機能障害については、運動機能低下は認めなかったが認知機能低下を認め、術後6週で最低の傾向であったことから、組織学的にOLGは減少後回復を認めたものの、認知機能障害は残存することが示唆された。

采用SD大鼠（雄性，体重210-250 g），采用永久性双侧颈总动脉闭塞法建立慢性脑缺血模型，术后2、4、6、8周分为4组。脑组织评价是在前囟后方0.30mm处制作冠状切片，切片厚度为20μm，使用抗NG2抗体（少突胶质祖细胞：OPC标记）和抗GST-π抗体（成熟少突胶质细胞：OLG标记）进行脑组织评价。 ））通过免疫组织化学染色。另外，对胼胝体1个视野（×400）内的NG2阳性细胞数和GST-π阳性细胞数进行评价和比较（n=6）。各组处死前5 d通过水迷宫测试进行认知功能评价(n=10-14)。术前连续 3 天、术后 1、3、5 天以及术后 1 至 8 周每周使用 Rotarod 测试评估运动功能 (n = 6)。免疫组化染色结果显示，缺血组4周时NG2阳性细胞数较对照组明显增加（P<0.05），此后继续呈增加趋势。缺血组GST-π阳性细胞数较对照组呈减少趋势，2周时明显减少（P<0.05）。水迷宫测试结果显示，缺血组的表现明显低于对照组。当比较缺血组时，缺血组的 6 周时间有较短的趋势。 Rotarod试验的结果显示，虽然缺血组与对照组相比略有下降2-3周，但没有观察到明显差异。上述结果首次在慢性脑缺血模型中检验OPC和OLG动态与脑功能障碍的关系，峰值出现在术后4周，OLG被认为已恢复到与Sham组相同的水平。几周。至于脑功能障碍，没有观察到运动功能下降，但观察到认知功能下降，并且在术后6周观察到最低趋势，表明该障碍仍然存在。