新奇体性幹細胞標識抗体Ａ３の生物学的特性と毛の発生・病態における機能的役割の解明

阐明新干细胞标记抗体 A3 的生物学特性及其在毛发发育和病理学中的功能作用

基本信息

批准号：
13J09632
负责人：
加藤智彩
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Osaka Prefecture University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

A3はラット悪性線維性組織球種（MFH）の株化細胞を抗原として作製された抗体であり、ラットの体性幹細胞を認識することが明らかとされている。本研究ではラットの毛包形成および皮膚創傷治癒におけるA3標識細胞の機能と役割を解明することを目的とし、組織学的および分子生物学的解析を行った。A3標識細胞は、毛包の発生期および毛周期において、毛包上皮幹細胞が存在するとされるバルジ付近と、間葉系幹細胞を含む毛包結合織鞘に発現し、皮膚創傷治癒では、これらに加えて被蓋化上皮で発現が観察され、発現範囲および発現数が増大した。さらに、A3標識細胞の特性を調べるため、全身におけるA3標識細胞の分布を観察したところ、体性幹細胞の存在するとされる部位に一致した。これらのことから、A3は、毛包形成および皮膚創傷治癒に関与する未分化上皮および未分化間葉細胞のいずれも標識し、既存の幹細胞抗体とは異なる細胞を標識する、新たな抗体であることが示された。また、A3のエピトープ解析を目的として分子生物学的解析を行った。A3の抗原（A3抗原）を高発現する株化細胞であるMT-9細胞をサンプルとして用い、Native PAGEおよびWestern Blotting法によって抗原を分離したところ、高分子領域に幅広く拡散した単一のバンドが得られ、糖を染色するPAS染色に陽性を示した。また、N型糖鎖消化試験、糖鎖解析、MT-9細胞に対する糖鎖合成阻害試験、抗ケラタン硫酸抗体による免疫沈降およびWestern Blotting法により、A3抗原はヒト人工多能性幹細胞に発現する、硫酸化度の低いケラタン硫酸と類似する可能性が示唆された。糖鎖は細胞の情報伝達に関与し、個体発生において重要な役割を担っているとされる。本研究により、低硫酸化ケラタン硫酸を発現する細胞がラットの毛包形成および皮膚創傷治癒に関与する可能性が示唆された。

A3是由装饰的纤维组织（MFH）兼容细胞（MFH）作为抗原产生的抗体，清楚地发现可以识别大鼠型干细胞。在这项研究中，进行了组织和分子生物学分析，以阐明大鼠和治愈皮肤伤口中A3信号细胞的功能和作用。 A3标志细胞在毛囊的出现和毛相中表达，并在凸起的附近表达，据说具有头发包装器干细胞，以及包含毛甲基干细胞的头发包裹的结合鞘，以及在皮肤伤口愈合中。此外，为了检查A3标志细胞的特征，观察到了全身A3信号细胞的分布，并且与被认为是物理干细胞的位点一致。从这些事实中，A3是一种新抗体，表明细胞与现有的干细胞抗体不同，所有迹象和非动物上皮和未实现的试验细胞参与了头发包裹和皮肤伤口愈合。此外，为A3表现分析进行了分子生物学分析。 MT-9细胞是高度表达A3抗原（A3抗原）的库存细胞，用作样品，当抗原通过天然页面和蛋白质印迹方法分离时，单个条带在聚合物区域中广泛扩散。它是获得染色糖的pa染色的阳性的。 A3抗原通过N型糖链消化测试，糖链分析，糖链合成测试MT-9细胞，用抗硫酸盐硫酸盐抗体和蛋白质印迹法表达A3抗原。可能类似于低硫酸盐的硫酸盐。糖链参与细胞信息传播，并在个人发育中起重要作用。这项研究表明，含有硫酸合唱的细胞可能参与大鼠和治愈皮肤伤口。