脂肪幹細胞で外部吸収の抑制は可能か

脂肪干细胞是否可以抑制外部吸收？

基本信息

批准号：
15K11373
负责人：
荒井清司
金额：
$ 2.41万
依托单位：
Nihon University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-04-01 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

外傷により完全脱臼した歯を再植した場合, 予後を左右するのは歯根膜細胞の状態である。そこで、本研究の目的は、完全脱臼歯の動物モデルを作製し、脂肪由来幹細胞 (Adipose tissue Derived Mesenchymal Stem Cell:以下 Ad-MSC)の脱臼歯への応用により、脱臼歯の合併症である歯根吸収を抑制することができるかを検討することである。Ad-MSCは多くの間葉系幹細胞を含み骨芽細胞などの間葉系に即する細胞への分化能を有するとされており、調整が容易である利点がある。平成28年度は、平成27年度に引き続き、完全脱臼歯の動物モデルによるAd-MSCの応用の検討を行った。生後3年齢のビーグル犬から脂肪採取を行い,　無血清培地を用いて脂肪幹細胞培養を行い幹細胞マーカーであるCD13,CD29,CD105が検出できた。全身麻酔下で抜歯後、実験群は120分間牛乳に歯を浸漬し、Ad-MSCを歯根膜周囲に塗布し、再植後スプリントとコンポジットレジンにて固定を行った。対照群は、Ad-MSCを用いない歯とした。動物を安楽死させ、通法に従い、完全脱臼歯モデルにH.E.重染色およびTRAP染色を行った。対照群では、TRAP陽性細胞の存在から破歯細胞による歯の外部吸収が確認された。Ad-MSCを応用した実験群は、歯の外部吸収は抑制されている傾向が認められた。また、脂肪肝細胞の定着の局在について検討した。脂肪幹細胞を生細胞染色キットを用いてラベリングし、脂肪幹細胞局在を検討したところ、歯根の側壁において、実験群では明瞭な生細胞が確認できた。Ad-MSCに含まれる間葉系幹細胞による効果である可能性が示唆された。

当因外伤而完全脱位的牙齿进行再植时，牙周膜细胞的状况决定了预后。因此，本研究的目的是建立完全脱位牙齿的动物模型，并将脂肪组织源性间充质干细胞（Ad-MSC）应用到脱位的牙齿上以治疗牙根，这是一种并发症目的是检查是否可以抑制脱臼的牙齿。 Ad-MSCs据说含有很多间充质干细胞，具有分化为成骨细胞等间充质细胞的能力，并且具有易于调节的优点。继2015年度之后，2016年度，我们利用牙齿完全脱位的动物模型，研究了Ad-MSC的应用。采集3岁比格犬脂肪，采用无血清培养基培养脂肪干细胞，检测干细胞标志物CD13、CD29、CD105。全身麻醉拔牙后，实验组牙齿浸入牛奶中120分钟，将Ad-MSCs涂抹在牙周膜周围，再植后用夹板和复合树脂固定牙齿。对照组是没有Ad-MSCs的牙齿。将动物处死，并根据标准方法对完全脱位的牙齿模型进行H.E.双重染色和TRAP染色。在对照组中，TRAP 阳性细胞的存在证实了破牙细胞对牙齿的外部吸收。在应用Ad-MSC的实验组中，观察到牙齿的外部吸收趋于受到抑制。我们还研究了脂肪肝细胞定植的定位。当使用活细胞染色试剂盒标记脂肪干细胞并检查脂肪干细胞的定位时，在实验组的牙根侧壁中确认了清晰的活细胞。有人认为这种效应可能是由于Ad-MSCs中含有间充质干细胞所致。