Examination of the effect of combination therapy of galectin-9 and epigallocatechin gallate on hepatocellular carcinoma

半乳糖凝集素9与表没食子儿茶素没食子酸酯联合治疗肝细胞癌的疗效观察

基本信息

批准号：
22K08078
负责人：
正木勉
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kagawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

緑茶に含まれるエピガロカテキンガレート（以下：EGCG）は疫学的に癌の発生予防効果が報告されており、ある種の癌細胞の抑制効果も報告されている。しかしながら肝癌の分子標的治療薬Lenvatinib、Sorafenib耐性癌細胞株に対するEGCGの効果は明らかではない。そのような耐性癌細胞を含む肝癌細胞株におけるEGCGの抗腫瘍効果について基礎的解析をした。【方法】（１）2種類の肝癌細胞株HuH-7、Hep3Bを用いて培養液中にLenvatinib、Sorafenibの濃度を1μMから10μMまで添加した。生存細胞のみをセレクションし、耐性肝癌細胞株を作成しIC50値の薬剤濃度を確認した。（２）耐性株におけるEGCGの細胞増殖抑制効果をMTT assayで解析した。（３）EGCGの抗腫瘍作用の効果に関連するmicroRNAを2563遺伝子が搭載されたアレイチップを用い網羅的に解析した。さらにLenvatinib、Sorafenib耐性肝癌細胞株Hep3Bをヌードマウスの皮下に移植し、EGCGを腹腔内に投与し、抗腫瘍効果を検討した。【成績】Hep3Bの野生株及びLenvatinib耐性株における48時間後のIC50値はそれぞ4.0μM、92.7μMであった。またHep3Bの野生株及びSorafenib耐性株ではそれぞれ2.0μM、11.4μMであり、それぞれの薬剤の耐性株を樹立した。Hep3B全ての細胞株においてEGCGの濃度依存的に細胞増殖抑制効果を示した。しかしながらHuH-7においては効果を示さなかった。また、EGCG投与前後にHep3BのmicroRNAは明瞭なクラスターを形成し、EGCG投与により抗腫瘍効果に関連するmicroRNA分子を見いだした。In vivoの解析においてもLenvatinib、Sorafenib耐性株に対する抗腫瘍効果を示した。

据报道，绿茶中包含的表藻酸酯食物酸酯（以下称为EGCG）对癌症的发展具有流行病学作用，并且据报道对某些癌细胞具有抑制作用。然而，EGCG对肝癌分子靶向治疗的影响，索非尼耐药性癌细胞系Lenvatinib尚不清楚。 EGCG在含有这种抗性癌细胞的肝癌细胞系中的抗肿瘤作用。方法（1）使用两种类型的肝癌细胞系HUH-7和HEP3B将Lenvatinib和Sorafenib的浓度从1μM添加到培养基中。仅选择活细胞，并创建耐药性肝癌细胞系来确认IC50值的药物浓度。（2）使用MTT测定法分析了EGCG在抗性菌株中的抑制作用。（3）使用带有2563个基因的阵列芯片对与EGCG抗肿瘤作用相关的microRNA进行了全面分析。此外，将Lenvatinib和抗索拉非尼耐药性肝癌细胞系HEP3植入了裸鼠，并腹膜内给予EGCG，以研究抗肿瘤作用。 [结果]野生和Lenvatinib抗性HEP3B的IC50值分别为4.0μm和92.7μm。此外，HEP3B的野生和索拉非尼抗性菌株分别为2.0μm和11.4μm，并且建立了每种药物的抗性菌株。 HEP3B在所有细胞系中抑制EGCG抑制细胞增殖的浓度依赖性作用。但是，在HuH-7中没有显示效果。此外，HEP3B的microRNA在施用EGCG之前和之后形成了清晰的簇，并且通过EGCG的给药发现了与抗肿瘤作用有关的microRNA分子。体内分析还显示抗肿瘤对Lenvatinib和索拉非尼抗性菌株的影响。