リンパ管内皮細胞分化を司る転写調節機構の解明
阐明控制淋巴管内皮细胞分化的转录调控机制
基本信息
- 批准号:07J05914
- 负责人:
- 金额:$ 1.73万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2007
- 资助国家:日本
- 起止时间:2007 至 2009
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
マウス発生期14.5日目の胎児胚においてソートされた血管内皮細胞およびリンパ管内皮細胞においてEts-2が発現していることが確認され、生体内のリンパ管内皮細胞でもEts-2の発現していることで生物学的により信憑性の高い結果を得ることができた。昨年度までにProx1結合因子として同定したEts-2が実際にリンパ管内皮細胞HDLECにおいてProx1と結合していることが免疫沈降により示されていたが、近年開発されたin situ Proximity Ligation Assayにより両者の結合を分子レベルで検討したところ、両者の結合が検出された。これによりリンパ管内皮細胞内でEts-2がProx1と直接結合していることを示唆する証拠がさらに得られた。血管内皮細胞HUVECにおいて他のProx1下流遺伝子integrin α9の発現がEts familyのdominant-negative mutantであるTM-Ets-1により抑制されることが明らかになり、TM-Ets-1によるVEGFR3の発現低下の結果(昨年度まで)と合わせて、複数のProx1下流遺伝子がEts familyの転写活性によって制御されていることが示唆された。内皮細胞において発現することが知られているEts family転写因子について血管内皮およびリンパ管内皮における発現を確認し、また293T細胞においてProx1との結合性を検討したところ、複数のEts family転写因子がProx1と結合することを見出した。HUVECにおいてProx1とEts-2を発現させてクロマチン免疫沈降を行ったところ、両者に対する抗体で、Prox1とEts-2それぞれのDNA結合(予測)配列を含むVEGFR3のプロモーター領域が免疫沈降され、Prox1とEts-2がVEGFR3のプロモーターに直接結合することがわかった。以上のことから、リンパ管内皮細胞でEts family転写因子がProx1の機能調節因子として働いていることが示され、リンパ管新生を制御する転写調節因子を同定することができた。
在胚胎发育第14.5天分选的小鼠胚胎中,证实Ets-2在血管内皮细胞和淋巴管内皮细胞中表达,并且在体内Ets-2也在淋巴管内皮细胞中表达。生物学上更可靠的结果。免疫沉淀显示去年被鉴定为 Prox1 结合因子的 Ets-2 实际上与淋巴内皮细胞 HDLEC 中的 Prox1 结合,当在分子水平上检查这种结合时,检测到了两者之间的结合。这提供了进一步的证据表明 Ets-2 直接与淋巴内皮细胞内的 Prox1 结合。血管内皮细胞 HUVEC 中另一个 Prox1 下游基因整合素 α9 的表达被 Ets 家族的显性失活突变体 TM-Ets-1 抑制。研究表明多个 Prox1 下游基因受 Ets 家族的转录活性调节。我们确认了已知在内皮细胞、血管和淋巴管内皮中表达的 Ets 家族转录因子的表达,并在 293T 细胞中检查了它们与 Prox1 的结合特性,发现它与 Prox1 结合。当 Prox1 和 Ets-2 在 HUVEC 中表达并进行染色质免疫沉淀时,使用针对两者的抗体对 VEGFR3 的启动子区域(包含 Prox1 和 Ets-2 的 DNA 结合(预测)序列)进行免疫沉淀。 2直接结合VEGFR3的启动子。上述结果表明Ets家族转录因子在淋巴管内皮细胞中充当Prox1的功能调节因子,我们能够鉴定控制淋巴管生成的转录调节因子。
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Ets Transcription Factors Ets-1/2 Positively Regulate Prox1-lnduced Expression of VEGFR-3 in Lyrnphatic Endothelial Cells
Ets 转录因子 Ets-1/2 正向调节 Prox1 诱导的淋巴内皮细胞中 VEGFR-3 的表达
- DOI:
- 发表时间:2007
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:吉松 康裕
- 通讯作者:吉松 康裕
Identification of targets of Prox1 during in vitro vascular differentiation from embryonic stem cells : functional roles of HoxD8 in lymphangiogenesis
胚胎干细胞体外血管分化过程中 Prox1 靶标的鉴定:HoxD8 在淋巴管生成中的功能作用
- DOI:
- 发表时间:2009
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Harada K.; et al
- 通讯作者:et al
Ets-2 physically and functionally interacts with Prox1 in lymphatic endothelial cell
Ets-2 在物理和功能上与淋巴内皮细胞中的 Prox1 相互作用
- DOI:
- 发表时间:2010
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:吉松康裕; et al
- 通讯作者:et al
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- 作者:
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- DOI:
- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
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- DOI:
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