副腎または性腺ステロイド産生細胞への分化に関与する因子のスクリーニング

筛选参与分化为肾上腺或性腺类固醇生成细胞的因子

基本信息

批准号：
18790636
负责人：
田中智子
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790636/
关键词：
ステロイドホルモン間葉系幹細胞再生医学発生・分化

项目摘要

1.副腎・性腺分化に関与することが報告されている因子のうち、WT1、DAX1、SF-1/Ad4BP、PBX1、CITED2、WNT4、SRYおよびSOX9をレンチウイルスベクターにてヒト骨髄由来間葉系幹細胞(hMSCs)に導入し、ステロイド産生細胞への分化に及ぼす影響を検討した結果、SF-1/Ad4BP導入細胞のみがステロイド産生性を示した。このことからSF-1/Ad4BPはhMSCsのステロイド産生細胞への分化に必須な因子であることが示唆された。2.hMSCsにWT1を強制発現した結果、内因性のSF-1/Ad4BPがmRNAレベルで発現誘導された。この結果は副腎・性腺分化カスケードと一致している。しかしながらWT1導入hMSCsではステロイド産生を認めなかった。この理由はWT1によってDAX1の発現が誘導され、DAX1がStARの発現を抑制するためと考えられる。3.SF-1/Ad4BPによる分化誘導時に発現量が変動した遺伝子のうちINHBB、MAFBについてそれぞれsiRNAによる発現阻害実験を行い、SF-1/Ad4BPによる分化誘導への影響について検討した。その結果、INHBB発現阻害細胞ではテストステロン産生が抑制され、MAFB発現阻害細胞ではプロゲステロン産生が抑制された。よって、INHBBおよびMAFBはステロイド産生細胞への分化またはステロイド産生の調節に関与している可能性が示唆された。

1. 在据报道参与肾上腺/性腺分化的因子中，WT1、DAX1、SF-1/Ad4BP、PBX1、CITED2、WNT4、SRY 和 SOX9 使用慢病毒载体在人骨髓来源的间充质细胞中表达。将其导入干细胞（hMSC）并检查其对分化为类固醇生成细胞的影响的结果是，只有导入SF-1/Ad4BP的细胞显示出类固醇生成性。这表明SF-1/Ad4BP是hMSC分化为类固醇生成细胞的重要因素。 2.由于WT1在hMSC中强制表达，内源性SF-1/Ad4BP在mRNA水平上被诱导表达。该结果与肾上腺-性腺分化级联一致。然而，在 WT1 转导的 hMSC 中没有观察到类固醇的产生。认为其原因是WT1诱导DAX1的表达，而DAX1抑制StAR的表达。 3.在SF-1/Ad4BP诱导分化过程中表达量发生变化的基因中，分别对INHBB和MAFB使用siRNA进行表达抑制实验，研究SF-1/Ad4BP对分化诱导的影响。结果，在INHBB表达受到抑制的细胞中睾酮产生受到抑制，并且在MAFB表达受到抑制的细胞中孕酮产生受到抑制。因此，提示INHBB和MAFB可能参与类固醇生成细胞的分化或类固醇生成的调节。