新規アセチル化制御因子・Xによるグロビン発現制御機構の解析

新型乙酰化调节因子 X 分析珠蛋白表达控制机制

基本信息

批准号：
12F02083
负责人：
杉山大介
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012 至 2013
项目状态：
已结题

项目摘要

平成25年度は、マウスの赤血球造血における新規アセチル化制御因子Xの機能に関して、以下の通り検討を行った。(1)マウス赤血球造血におけるXの発現解析、(2)マウス赤血球造血におけるXの機能解析、(3)Xの機能解析のためのX欠損マウスモデルの作製。(1)Xタンパク質の発現解析Xの検出に使用可能な市販の抗体がなかったため、免疫細胞化学染色およびウェスタンブロット分析によってXを検出可能な抗Xウサギ抗体を作製した。Xタンパク質は、造血前駆細胞、未熟赤血球及び成熟赤血球の核および細胞質の両方に局在していた。また、造血前駆細胞が成熟赤血球へと分化するにつれて、Xタンパク質発現が増加した。(2)Xの機能解析マウス胎仔肝臓は、造血前駆細胞が未熟赤血球及び成熟赤血球に分化する部位であり、赤血球造血研究のモデルとして利用されている。Xは造血前駆細胞を未熟赤血球へと誘導し、またα-、β-グロビン遺伝子の発現を増加させた。さらに、クロマチン免疫沈降法を用いて、Xタンパク質が造血前駆細胞を成熟赤血球へと誘導する遺伝子の発現レベルを増加させることにより、マウスの赤血球造血を誘導することが明らかになった。(3)X欠損マウスモデルの作製(2)はin vitroにおけるXの機能解析であり、生体内におけるXの機能をより詳細に解析するためには、in vivoで解析可能なX欠損マウスモデルの作製が必要である。現在、Xの欠損に使用可能な雄マウスを2匹所有しており、X欠損マウスの繁殖を行っている。

2013年，对新型乙酰化调节剂X在小鼠红细胞生成中的功能进行了以下研究。（1）分析小鼠红细胞造血的X表达，（2）小鼠红细胞造血中X官能分析的分析，以及（3）创建X缺陷小鼠模型进行X功能分析。（1）X蛋白的表达分析由于无法检测X的市售抗体，因此通过免疫细胞化学染色和蛋白质印迹分析制备了能够检测X的抗X兔抗体。 X蛋白位于造血祖细胞，未成熟和成熟的红细胞的细胞核和细胞质中。另外，随着造血祖细胞分化为成熟的红细胞，X蛋白表达增加。（2）X的功能分析小鼠的胎儿肝脏是造血祖细胞分化为未成熟的红细胞和成熟的红细胞的部位，并用作红细胞造血细胞造血研究的模型。 X诱导造血祖细胞对未成熟的红细胞，也增加了α-和β-珠蛋白基因的表达。此外，使用染色质免疫沉淀来揭示X蛋白通过增加诱导造血祖细胞的基因表达水平来诱导小鼠促红细胞生成的疾病。（3）创建X缺陷小鼠模型（2）是体外X的功能分析，为了在体内更详细地分析X，有必要创建一个缺陷的X缺陷小鼠模型，可以在体内分析。目前，我拥有两只可用于X缺乏症的雄性小鼠，并且正在繁殖X缺乏小鼠。

项目成果

期刊论文数量（0）

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科研奖励数量（0）

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专利数量（0）

GNAT-like protein down-regulates globin synthesis by binding acetyl CoA

GNAT 样蛋白通过结合乙酰 CoA 下调珠蛋白合成

DOI：
发表时间：
2012
期刊：
影响因子：
0
作者：
Kulkeaw;K. et al
通讯作者：
K. et al

Dppa3 accelerates erythroid differentiation accomapanied with globin synthesis in the mouse fetal liver.

Dppa3 加速小鼠胎儿肝脏中的红细胞分化并伴随珠蛋白合成。

DOI：
发表时间：
2014
期刊：
影响因子：
0
作者：
Kasem Kulkeaw;Ornnutchar Poungpair;Tomoko Inoue;Kanitta Srinoun;Chiyo Yanagi;Yuka Florio;Pa-thai Yenchitsomanus;Daisuke Sugiyama
通讯作者：
Daisuke Sugiyama

Dppa3 as a novel regulator of globin gene expression in mouse fetal liver erythropoiesis

Dppa3 作为小鼠胎肝红细胞生成中球蛋白基因表达的新型调节剂

DOI：
发表时间：
2012
期刊：
影响因子：
0
作者：
Kulkeaw;K. et al
通讯作者：
K. et al

Ectopic expression of Hmgn2 antagonizes mouse ervthroid differentiation in vitrn

Hmgn2的异位表达拮抗小鼠玻璃体内红细胞分化

DOI：
10.1042/cbi20110169
发表时间：
2012
期刊：
Cell Biol Int
影响因子：
3.9
作者：
Kulkeaw;K.;Inoue;T.;et al
通讯作者：
et al

Antibody-free flow cytometric analysis of zebrafish granulopoiesis by DNA-binding DRAQ5 dye.

通过 DNA 结合 DRAQ5 染料对斑马鱼粒细胞生成进行无抗体流式细胞术分析。

DOI：
发表时间：
2013
期刊：
影响因子：
0
作者：
Kasem Kulkeaw;Tomoko Inoue;Kanitta Srinoun;Tohru Ishitani;Yuka Tanaka;Keai Sinn Tann;Sarinthip;Preedagasamzin;Daisuke Sugiyama
通讯作者：
Daisuke Sugiyama