不妊症の新しい病態メカニズム解明への挑戦－胎盤形成前子宮環境の重要性－

阐明不孕症新病理机制的挑战 - 胎盘前子宫环境的重要性 -

基本信息

批准号：
11J05522
负责人：
森真弓
金额：
$ 0.83万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至 2012
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J05522/
关键词：
不妊症脱落膜子宮環境 DEDD 血管透過性

项目摘要

アポトーシス関連遺伝子として同定されたDEDD分子の欠損マウス(DEDD KO)が、メス不妊になる原因とその病態メカニズムを、分子レベルで解明することが本研究の目的である。不妊の原因の一つが脱落膜分化不全にあることは既に明らかにし、論文発表している。このため、第一に、脱落膜の分化や機能の制御をDEDDがどのようにおこなうかを追究し、第二に、子宮特異的なDEDD KOマウスを作出して、脱落膜細胞自身の持つDEDDが細胞内で分化に必須の役割を果たすかどうかを解析することとした。平成24年度の研究計画では、まず、in vitroの脱落膜分化系を用いて、DeddやAkt、CyclinD3の遺伝子導入実験やそれらの遺伝子のノックダウン実験により、多核化する割合の変化を調べることとした。遺伝子導入実験は昨年に検討済みであるため、遺伝子ノックダウン実験の条件検討をおこなった。ヒト及びマウスのDEDD遺伝子発現をそれぞれ抑えることが可能なsiRNAを設計し、現在ベクターを構築中である。マウスを用いた生理学的解析では、妊娠4.5～7.5日目の子宮組織におけるDEDD発現部位とサイクリンやAktの発現局在について詳細に調べた。その結果、脱落膜の血管内皮細胞ではAktやサイクリンではなくDEDDのみが局所的に強く発現していることが分かり、血管透過性を決定する血管内皮細胞の挙動にDEDDが関与するかどうかを調べることが最重要であると考え、血管内皮特異的にDEDDを発現するトランスジェニックマウスの作出を試みた。現在までに少なくとも2系統のトランスジェニックマウスを確立し、DEDDが血管透過性亢進に関与すると思われる表現型の結果を得ている。

这项研究的目的是阐明在分子水平上被鉴定为凋亡相关基因的DEDD分子（DEDD KO）的原因。他已经透露，不育的原因之一是由于电影差异的差异，并发表了论文。首先，我们追求DEDD如何执行滴滴膜的差异化和功能的控制，其次，创建了特定于子宫的DEDD KO鼠标，并且Drop -Off膜单元本身具有。首先，在2012年的研究计划中，使用基因引入实验DEDD，AKT和CYCLIND3的基因引入实验以及这些这些实验的敲击实验，首先使用In -Vitro fall膜分化系统来检查多个核的百分比的变化基因。由于去年考虑了基因引入实验，因此检查了基因敲除实验的条件。设计的siRNA可以抑制人类和小鼠的DEDD基因表达，并且目前正在构建向量。在使用小鼠的生理分析中，我们检查了DEDD的第4.5至7.5天的DEDD表达位点以及妊娠4.5至7.5天的骑自行车和AKT的位置。结果，发现只有DEDD而不是Akt或细胞周期蛋白在掉落的膜中局部表达在血管内皮细胞中，并检查DEDD是否参与了确定血液透明度的血管内皮细胞的行为。最重要的是，试图创建一个专门表达DEDD的转基因鼠标。迄今为止，已经建立了至少两只转基因小鼠，并且DEDD获得了表达-Type结果，这些结果可能与增强血管通透性有关。