癌を標的とした T 細胞免疫機能に対する細胞代謝における老化因子の役割の解明

阐明细胞代谢中的衰老因子对靶向癌症的T细胞免疫功能的作用

基本信息

批准号：
21K20670
负责人：
森真弓
金额：
$ 1.33万
依托单位：
Kyoto University (2022)Foundation for Biomedical Research and Innovation at Kobe (2021)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-08-30 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K20670/
关键词：
がん免疫免疫老化代謝老化免疫 T細胞

项目摘要

本研究の目的は、癌を標的とした免疫細胞における老化因子または抗老化因子を同定し、特にT細胞免疫による癌除去機能に関与するような細胞代謝を司る因子の影響を明らかにすることである。前年度は、抗原特異的なT細胞活性における代謝経路の影響を調べるため、OT-IまたはOT-II TCRトランスジェニックマウス脾臓からT細胞を単離し、各々のTCR特異抗原ペプチド等を用いて刺激した。同時に代謝関連薬剤で処理し、PD1やCD153などの老化指標を比較した。その結果、様々な代謝経路に関わる重要な因子として、まずビタミンDに着目した。本年度はこの結果についてOT-I TCRを持つCD8T細胞に着目してさらに解析することにした。ビタミンDによるOT-I T細胞の抗原反応や細胞増殖・細胞の生存について再現性を確認し、フローサイトメトリーにより表面抗原として老化指標となるPD1やCD153の変化を調べた。またさらに、このT細胞からRNAを抽出し、QPCRによって老化と関わる細胞周期調節因子などの発現を定量的に調べた。一方、マウス生体実験では、癌抗原特異的なT細胞免疫に対するビタミンDの影響を評価するため、特異抗原を発現するマウス癌細胞株EG7をLy5.1(CD45.1+)マウスに皮下移植し、同時にOT-I T細胞を尾静注して癌を認識させた。培養中のEG7癌細胞の増殖や生存はビタミンDにより直接影響を受けることがわかったため、癌移植マウスにビタミン投与する代わりに、OT-I T細胞をトランスジェニックマウスから単離して培養中にビタミンD処理したものとしていないもので比較解析した。移植癌細胞の増殖とその抑制を、腫瘍体積や重量、癌組織に浸潤したOT-I T細胞数を基準として評価した。移植に成功したマウスは3～5匹と少ないが、ビタミンDを与えたT細胞はそうでない細胞と同等かそれ以上に癌を縮小させた。

这项研究的目的是确定针对癌症的免疫细胞中的衰老因素或抗衰老因子，并阐明控制T细胞免疫的癌症去除功能的细胞代谢的影响。在上一个财政年度，T细胞从OT-I或OT-II TCR转基因小鼠脾脏的脾脏中溶解，以检查代谢路线在抗原特异性T细胞活性中的影响，并刺激每种TCR特异性抗原肽。同时，将老化指标（例如PD1和CD153）与代谢药物进行了比较。结果，我们首先将维生素D作为与各种新陈代谢途径相关的重要因素。今年，我们决定进一步分析此结果，以使用OT-I TCR上的CD8T细胞。确认了通过维生素D和细胞增殖和细胞的存活率对OT-I-T细胞的抗原反应的可重复性，并检查了PD1和CD153的变化，这是通过流动部位的衰老指示器作为表面抗原的老化指示器，检查。此外，从该T细胞中提取RNA，QPCR定量检查了与衰老有关的细胞周期调节因子的表达。另一方面，在小鼠生物学实验中，向Ly5.1（CD45.1+）小鼠表示特定抗原的小鼠癌细胞量EG7评估维生素D对癌症抗原特异性T细胞免疫的影响同时，OT-I T细胞被命令识别癌症。由于在培养物下的EG7癌细胞的生长和存活率，因此发现维生素D直接影响，因此，在培养过程中，维生素含有维生素，而不是从转基因小鼠中分离出OT-I T细胞与未加工的相比和分析。根据肿瘤体积，体重和癌症组织中浸润的OT-I T细胞数量评估移植的癌细胞的增殖和抑制。有3至5只小鼠在移植方面取得了成功，但是给予维生素D的T细胞降低了癌症和非细胞。