皮膚親和性CD8Tリンパ球の分化とフコース転移酵素群の発現解析

趋肤性CD8T淋巴细胞分化及岩藻糖基转移酶组表达分析

基本信息

批准号：
17790776
负责人：
高橋良
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Kyorin University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

皮膚のウィルスからの感染防御は、主にCD8+ T細胞等が末梢血から皮膚へ浸潤(ホーミング)して行っているが、CD8+T細胞がどのように皮膚へ特異的にホーミングするのかはよく判っていない。我々はナイーブCD8T細胞をanti-CD3抗体で刺激し、in vitroで培養後、皮膚ホーミングレセプターのE-selectin ligand (ESL)、およびCutaneous Lymphocyte-associated Antigen(CLA)、そしてESLとCLAの合成を司るフコース糖転移酵素(FucT-VII)の発現を継時的に調べた。その結果、まずFucT-VIIの発現が高まった後ESLの弱い発現が認められた。一方、CLAの発現はCD3の刺激を中止するとCLAの発現が見られ、それに比例してESLの発現が高まった。ESLの発現が一番高い状態はCLA・ESL・FucT-VIIが発現している時で、その後FucT-VIIの発現が消失するとともに次第にCLA・ESLの発現は弱まった。さらに我々はこれらのフェノタイプのCD8+細胞が実際に皮膚へ浸潤しているのかを調べる為に、CD8が浸潤していることが判っている病変部分の組織標本をCD8およびCLA、FucT-VII抗体で染色した。その結果、浸潤している70%以上のCD8+T細胞がCLA+FucT-VII+のフェノタイプを示している事が明らかになった。すなわち、in vitroの実験で明らかになったCLA+ESL+FucT-VII+のフェノタイプが、実際に皮膚に浸潤している事が判った。なお、近年CLA上のCD43分子が真のESLではないのかと報告されたが、我々はESL、CLAおよび抗CD43抗体で染色した結果、CD43分子とこれらの分子発現に有意差は明らかにならなかった。

皮肤对病毒感染的防御主要是通过CD8+T细胞从外周血浸润（归巢）到皮肤来进行的，但目前尚不清楚CD8+T细胞是如何特异性归巢到皮肤的。我们用抗 CD3 抗体刺激幼稚 CD8T 细胞，体外培养后产生皮肤归巢受体 E-选择素配体 (ESL) 和皮肤淋巴细胞相关抗原 (CLA)，它们负责 ESL 和 CLA 的合成。随着时间的推移检查岩藻糖糖基转移酶（FucT-VII）的表达。结果，FucT-VII的表达首先增加，随后ESL的表达减弱。另一方面，当CD3刺激停止时观察到CLA表达，并且ESL表达成比例增加。 ESL表达最高的状态是CLA、ESL和FucT-VII表达时，然后随着FucT-VII表达消失，CLA和ESL表达逐渐减弱。此外，为了研究这些表型CD8+细胞是否确实浸润到皮肤中，我们从已知被CD8浸润的病变中收集了组织标本，使用CD8、CLA和FucT-VII抗体对其进行了染色。结果显示，超过 70% 的浸润 CD8+ T 细胞表现出 CLA+FucT-VII+ 表型。换句话说，发现体外实验中揭示的CLA+ESL+FucT-VII+表型实际上已渗透到皮肤中。近年来，有报道称CLA上的CD43分子并不是真正的ESL，但我们的结果显示，用ESL、CLA和抗-ESL染色后，CD43分子和这些分子的表达没有显着差异。 CD43 抗体。