T細胞の皮膚ホーミングレセプターとそれを制御する糖転移酵素の発現動態

T 细胞皮肤归巢受体和控制它们的糖基转移酶的表达动态

基本信息

批准号：
13770472
负责人：
高橋良
金额：
$ 1.73万
依托单位：
Kyorin University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

皮膚に特異的に浸潤するリンパ球は,Fucosyltransferase VII : FucT-VIIによって発現が制御される皮膚homing receptor(E-selectin ligand : ESL)を発現し,それは皮膚リンパ球関連抗原(CLA)と考えられているが,その発現機序や分化過程はよく判っていない。本研究は健常人の末梢血からnaive CD4T細胞を分離後,培養を行い経時的にFucT-VII及びCLAの発現を解析した。さらにESLを可視化するsystemを開発し分析した結果,新たな知見を得た。1,CLAとFucT-VIIの発現kineticsを初めて明らかにした。それは細胞の活性化初期にFucT-VIIが一過性に発現し,それがピークに達した後CLAが発現した。2,ESLを可視化するsystemにより,CLAがESLでは無いことを初めて直接的に実証した。3,前述のkineticsで,細胞がいつE-selectinに接着するのかを調べた結果,CLAが発現してなくても細胞が接着した。それはFucT-VIIの発現にわずかに遅れて見られた。これらの解析の結果より,(A)CLAは皮膚homing receptorでは無いことを直接的に証明した。(B)FucT-VII, ESL, CLAの発現様式を調べることで,未知だった皮膚homing CD4T細胞の分化パターンを明らかにした。以上をまとめると,CLAが真の皮膚homing receptorでは無く,我々が開発したsystemを用いることによって初めてその評価をすることが可能になった。現在,これらの結果をまとめて論文を投稿中である。さらに,我々はCLAの発現が強いとされているTh1細胞を作成し,CLAの発現をdown-regulateするIL-4を添加して培養を行った結果,CLAの発現が消失したが,ESLは維持されていたことを発見した。今後はCLAの発現が無いとされているTh2細胞を作成し,本研究のsystemを用いて詳細に研究する。最終的にこれらの知見を集積し,より統合された観点からのhoming機序の理解に達し,結果として感染症やアレルギー疾患に資するような成果を得たい。

特异性浸润皮肤的淋巴细胞表达皮肤归巢受体（E-选择素配体：ESL），其表达受岩藻糖基转移酶VII：FucT-VII控制，被认为是皮肤淋巴细胞相关抗原（CLA），但其表达机制和。分化过程还没有被很好地理解。在这项研究中，从健康个体的外周血中分离出幼稚CD4T细胞，进行培养，并分析FucT-VII和CLA随时间的表达情况。此外，通过开发和分析ESL可视化系统，获得了新的知识。 1.首次揭示CLA和FucT-VII的表达动力学。 FucT-VII在细胞活化初期短暂表达，达到峰值后表达CLA。 2.利用ESL可视化系统，我们第一次直接证明了CLA不是ESL。 3.利用上述动力学，我们研究了细胞何时粘附E-选择素，发现即使CLA不表达，细胞也会粘附。观察到 FucT-VII 的表达略有延迟。这些分析的结果直接证明(A) CLA不是皮肤归巢受体。 (B)通过检查FucT-VII、ESL和CLA的表达模式，我们阐明了以前未知的皮肤归巢CD4T细胞的分化模式。总之，CLA并不是真正的皮肤归巢受体，使用我们开发的系统首次可以对其进行评估。我们目前正在提交一篇总结这些结果的论文。此外，我们生成了已知强烈表达 CLA 的 Th1 细胞，并在添加 IL-4 的情况下培养它们，IL-4 下调了 CLA 的表达。结果，CLA 表达消失了，但我发现 ESL 并没有维持。。今后，我们将创建不表达CLA的Th2细胞，并使用本研究的系统对其进行详细研究。最终，我们希望积累这些发现，从更综合的角度理解归巢机制，从而得出有助于治疗传染病和过敏性疾病的结果。