Molecular mechanism of assembly and control of mammalian replication factories

哺乳动物复制工厂组装和控制的分子机制

• 批准号: 22570178
• 负责人: MIZUNO Takeshi
• 金额: $ 3万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22570178/
• 关键词: DNAポリメラーゼα; 染色体複製; ポリメラーゼα特異的阻害剤; デヒドロアルテヌシン; 複製工場; pot1; 天然変性タンパク質; 染色体末端; テロメア; DNAポリメラーゼ; 核内品質管理機構; 温度感受性変異体; 核内タンパク質分解; HSP90; tsFT20; noboviocine; DNA複製; タンパク質分解; 複製フォーク; ゲノム恒常性; 細胞ストレス

To understand molecular mechanism of mammalian DNA replication, I have focused on mouse DNA polymerase alpha. According to extensive analysis of DNA polymerase alpha,1) we developed a novel potent inhibitor for mammalian DNA polymerase alpha, from derivatives of dehydroaltenusin. Using this novel inhibitor, we discussed that uncoupling of leading strand synthesis and lagging strand synthesis caused aberrant RPA foci in mammalian nucleus in NIH3T3 cells. 2) Characterization of temperature-sensitive mutant cell line which has mutation in DNA polymerase alpha, suggested novel nuclear protein quality control mechanism to eliminate aberrant proteins from nucleus. In this quality control mechanism involves HSP90 and PA28gamma. 3) Interaction between DNA polymerase alpha and pot1 revealed intrinsically disordered region of DNA polymerase alpha serves as molecular binding site for chromatin binding protein which contains typical OB-fold containing proteins such as RPA, Mcm10, pot1, CST complex.

为了了解哺乳动物 DNA 复制的分子机制，我重点研究了小鼠 DNA 聚合酶 α。根据对 DNA 聚合酶 α 的广泛分析，1) 我们从脱氢阿藤菌素衍生物中开发出一种新型有效的哺乳动物 DNA 聚合酶 α 抑制剂。使用这种新型抑制剂，我们讨论了前导链合成和滞后链合成的解偶联导致 NIH3T3 细胞中哺乳动物细胞核中异常的 RPA 病灶。 2) DNA聚合酶α突变的温度敏感突变细胞系的表征，提出了新的核蛋白质量控制机制，以消除细胞核中的异常蛋白。在这个质量控制机制中涉及HSP90和PA28gamma。 3) DNA聚合酶α和pot1之间的相互作用揭示了DNA聚合酶α本质上无序的区域作为染色质结合蛋白的分子结合位点，其包含典型的OB折叠蛋白，例如RPA、Mcm10、pot1、CST复合物。

项目成果

Nuclear protein quality control mechanism involves HSP90 to eliminate aberrant proteins from nucleus

核蛋白质量控制机制涉及HSP90以消除细胞核中的异常蛋白

• 发表时间: 2012
• 作者: Takeshi Mizuno;Miwa Higaki;Asami Shibuya;Fumio Hanaoka;Naoko Imamoto
• 通讯作者: Naoko Imamoto

分子生物学

分子生物学

• 发表时间: 2013
• 作者: 海老原 充;堂前弘志;美馬秀男;池口 新一郎;海老原充
• 通讯作者: 海老原充

哺乳類細胞核内タンパク質品質管理機構はHSP90と核内のプロテアソームによるタンパク質分解により維持される。Mammalian nuclear protein quality control is mediated by HSP90 and PA28gamma.

哺乳动物细胞核中的蛋白质质量控​​制机制是通过 HSP90 和核蛋白酶体的蛋白质降解来维持的。

• 发表时间: 2012
• 作者: 水野 武;渋谷麻実;花岡文雄;今本尚子
• 通讯作者: 今本尚子

細胞核内にて働く品質管理機構の提唱

提出在细胞核内运行的质量控制机制

• 发表时间: 2010
• 作者: 水野武;他
• 通讯作者: 他

Structure and Mutagenesis Studies of the C-terminal Region of Licensing Factor Cdt1 Enable the Identification of Key Residues for Binding to Replicative Helicase Mcm Proteins

• DOI: 10.1074/jbc.m109.075333
• 发表时间: 2010-05-21
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Jee, JunGoo;Mizuno, Takeshi;Shirakawa, Masahiro
• 通讯作者: Shirakawa, Masahiro