CCR4-NOT複合体による心機能制御の分子機構の解明研究

阐明CCR4-NOT复合物调节心脏功能的分子机制的研究

基本信息

批准号：
22390155
负责人：
久場敬司
金额：
$ 8.65万
依托单位：
Akita University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22390155/
关键词：
CCR4-NOT CNOT3 RNA 心不全 QT時間転写エピジェネティクス

项目摘要

CCR4-NOT蛋白複合体は、種間で保存された遺伝子発現調節因子であり、主に転写調節とmRNA分解の2つの活性を介して遺伝子発現制御の中心的役割を担う。私達はゲノムワイドなショウジョウバエin vivo心不全スクリーニングから、CCR4-NOT蛋白複合体の構成因子Cnot3がヒトやマウスでも心機能調節に重要な役割を担うことを見出した。本研究はCCR4-NOT蛋白複合体による心機能制御のメカニズムの解明を目的とし、平成22年度は下記の3項目について検討を行った。1)Cnot3遺伝子欠損マウスの心電図QT時間、不整脈の解析:Cnot3ヘテロ遺伝子欠損マウスの新生仔を用いて不整脈や突然死の原因となるQT時間の変化を心電図で測定したところ、Cnot3欠損マウスで有意にQT時間が延長し、房室ブロックなどの不整脈の発症を認めた。網羅的な遺伝子発現解析から、この不整脈発症には、RNA代謝異常が関与していることが示唆され、とりわけCCR4-NOT複合体の生物活性のひとつであるmRNAのpoly-A鎖の脱アデニル化(デアデニレース)が原因であることが考えられた。2)デアデニレース欠損マウスの心電図QT時間、不整脈の解析:CCR4-NOTの構成因子でデアデニレース活性をもつ因子の遺伝子欠損マウスを共同研究で作製し、その心電図を解析したところ、Cnot3欠損マウスと同様にデアデニレース欠損マウスはQT時間の延長を認めた。よって、CCR4-NOT複合体は、mRNAのpoly-A鎖の脱アデニル化を介して心臓の正常な洞調律の制御に寄与していることが分かった。3)CCR4-NOT構成因子の遺伝子欠損マウスの作製:CCR4-NOT構成因子で遺伝子の完全欠損により胎生致死となるものについて、Cre-loxPによる条件付け遺伝子欠損マウスを2系統、新たに作出した。現在、心筋特異的な遺伝子欠損マウス作製のためのCreマウスとの交配を行っている。

CCR4-NOT蛋白复合物是存储在该物种中的基因表达调节因子，并且主要通过两种活性，转移控制和mRNA分解在基因表达控制中起着核心作用。我们发现，体内心力衰竭筛查中的基因组宽的shoujobae发现，CCR4-NOT蛋白质复合构型因子CNOT3在人和小鼠的控制中起着重要作用。这项研究是为了阐明CCR4-NOT蛋白复合物的心脏功能控制机制，并在2010财年进行了以下三项。 1）CNOT3 ECG QT时间和CNOT3基因缺乏小鼠的心律不齐，心律不齐的分析：QT时间的CNOT3变化是灾难性的，是灾难性和猝死的，用新生在异源基因缺乏的小鼠中，并在CNOT3 Fiffic fiffife cnot3中测量。 QT时间延长了，并且确认心律不齐的发展。全面的遗传表达分析表明，RNA代谢异常与该心律失常有关，尤其是mRNA Poly-A链，这是CCR4-不复合物的生物学活性之一。 2）Dear Deni蕾丝缺陷小鼠ECG QT时间和心律不齐分析：CCR4-不构型因子在关节研究中创建了因子活性的基因缺陷小鼠，并分析了鼠标缺失的小鼠。时间。因此，发现CCR4不复合物通过将mRNA的多A链配音配音来控制心脏正常的鼻窦调节。 3）使CCR4的基因缺陷鼠标不构型因子：Cre-loxp条件基因缺陷小鼠是为Cre-loxP创建的两个新创建的CRE-loxp基因缺陷的CCR4-NOT构型构型构型因子。目前，他正在与Cre小鼠穿越基因缺乏小鼠。